[发明专利]使用包括经间隔子附着于大分子的底物的修饰的底物的酶测量分析无效

专利信息
申请号: 200680053447.9 申请日: 2006-12-21
公开(公告)号: CN101657545A 公开(公告)日: 2010-02-24
发明(设计)人: 莱斯利·R·贝里;薇拉·伊格尼亚托维奇;保罗·T·莫纳格勒;陈锦泉 申请(专利权)人: 麦克马斯特大学;墨尔本大学
主分类号: C12Q1/37 分类号: C12Q1/37;C07K5/00;C07K7/00;C12N9/64;G01N33/52
代理公司: 北京英赛嘉华知识产权代理有限责任公司 代理人: 王达佐;韩克飞
地址: 加拿大*** 国省代码: 加拿大;CA
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摘要:
搜索关键词: 使用 包括 间隔 附着 大分子 修饰 测量 分析
【权利要求书】:

1.修饰的底物,所述修饰的底物能够与游离酶反应而不与结合于分子陷阱的酶反应,所述修饰的底物包括经间隔子附于大分子的底物。

2.如权利要求1所述的修饰的底物,其中所述间隔子包含3至50个原子。

3.如权利要求2所述的修饰的底物,其中所述间隔子包含9至15个原子。

4.如权利要求3所述的修饰的底物,其中所述间隔子包含12个原子。

5.如权利要求1所述的修饰的底物,其中所述底物是肽并且所述酶是蛋白酶。

6.如权利要求5所述的修饰的底物,其中所述酶选自凝血酶、Xa因子、活化的蛋白C、纤溶酶、组织纤溶酶原激活物、尿激酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶、枯草杆菌蛋白酶、嗜热菌蛋白酶、木瓜蛋白酶和组织蛋白酶B。

7.如权利要求6所述的修饰的底物,其中所述酶是凝血酶。

8.如权利要求1所述的修饰的底物,其中所述大分子选自琼脂糖珠、琼脂糖凝胶珠、聚苯乙烯珠、聚乙烯、聚丙烯、聚氨酯、聚苯乙烯、聚氧化乙烯、聚酰胺、聚酯、聚碳酸酯、达可纶、葡聚糖、聚四氟乙烯、蛋白、多糖和多核苷酸。

9.如权利要求8所述的修饰的底物,其中所述大分子是琼脂糖珠。

10.如权利要求8所述的修饰的底物,其中所述大分子是聚苯乙烯。

11.检测样品中相对于结合酶的游离酶的方法,所述方法包括:

i.获得如权利要求1定义的修饰的底物;

ii.将所述底物与所述样品结合;以及

iii.检测生色信号、荧光信号或化学发光信号。

12.如权利要求11所述的方法,其中所述修饰的底物与容器表面非共价地结合。

13.如权利要求11所述的方法,其中所述修饰的底物与容器表面共价地结合。

14.如权利要求11所述的方法,其中所述酶是凝血酶。

15.测量游离酶活性的试剂盒,所述试剂盒包含如权利要求1定义的修饰的底物。

16.如权利要求15所述的试剂盒,所述试剂盒还包含反应缓冲液和组织因子。

17.如权利要求15所述的试剂盒,其中所述修饰的底物与反应容器的表面结合。

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