[发明专利]一种用于抗体清除的血液净化吸附剂及其制备方法

说明书

技术领域：

本发明涉及生物医学领域中用于抗体清除的血液净化吸附剂及其制备方法。

背景技术

自身抗体和免疫复合物已被证实与一系列疾病的产生和发展密切相关，如免疫反应(过敏，移植排斥)、自身免疫性疾病(系统性红斑狼疮，类风湿等)，甚至于癌症。因此，临床上需要一种能够从人血液中选择性地清除自身抗体和循环免疫复合物的吸附剂，以缓解急性症状，遏制病情发展进而对疾病起到治疗作用。随着此类疾病尤其是自身免疫性疾病发病率的逐年提高，这种需求也越来越大。基于上述考虑，目前已有多家机构开发出不同性质的吸附剂材料，其中一些已经应用到临床。

应用于血液净化的吸附剂一般由两部分组成：作为吸附剂基质的高分子载体材料和利用化学交联固定在载体表面的配基分子，其中配基分子的结构和性质决定了吸附剂的作用效果。目前，临床中主要采用的两种用于抗体吸附的血液净化吸附剂分别以蛋白A和疏水氨基酸作为配基分子。

蛋白A是某些金黄色葡萄球菌细胞壁的一种蛋白组分，它对人类和其他哺乳动物的多种免疫球蛋白具有可逆的亲和作用，特别是对免疫球蛋白G(IgG)的Fc区具有较强的结合能力。同时，Phillips等人也发现蛋白A对循环免疫复合物(Circulating immune complexes)也具有较强的特异性相互作用(T.M.Phillips，Analytical Techniques inImmunochemistry；New York：Marcel Dekker，Inc.，1992，p.75)。目前，蛋白A作为一种典型的生物亲和配基已被用于临床中上述疾病患者体内自身抗体和免疫复合物的清除。Prosorba和Immunosorba(Fresenius，Germany)是两种目前应用最为广泛的蛋白A吸附剂，分别以硅胶和琼脂糖作为载体基质。国内也有同类产品(中国专利：99112880.X)。对于这一类采用蛋白A作为配基的吸附剂，其优点在于利用生物分子间天然的亲和作用，能够实现对目标分子的特异性识别，从而达到较高的吸附选择性。但其缺点在于蛋白A作为具有生物活性的蛋白质分子，需要从金黄色葡萄球菌或基因工程菌中获得，其生产成本很高。目前Prosorba吸附柱的市场价约为1000欧元，而一对可切换使用的Immunosorba吸附柱市场价约为10000欧元。同时，蛋白质配基在固定化和保存过程中不稳定，易失活；虽然能够再生，重复使用，但也存在难以在线清洗灭菌的问题和配基分子脱落的隐患。以上这些缺点限制了蛋白A免疫吸附剂在临床中的使用。

Noriko Hirata报道了两种分别采用苯丙氨酸和色氨酸作为吸附基团，固定在载体基质上，用作吸附血液中抗体类组分和免疫复合物的吸附剂材料(Noriko Hirata，ToshijiKuriyama，and Naokuni Yamawaki，Immusorba TR and PH；Therapeutic Apheresis andDialysis，2003，7(1)：85-90)。中国专利200410021373.3中也涉及一种利用组氨酸作为吸附基团的吸附剂材料。除此以外，亦有采用聚氨基酸作为吸附基团用在此领域的报道(中国专利03130403.6)。在吸附剂的设计合成中采用氨基酸，尤其是疏水性氨基酸作为吸附基团，以此替代蛋白A，是新一代血液净化吸附剂的特征之一。采用人工合成的小分子化合物基团的好处在于产品价格低廉，结构相对稳定。但是，采用什么样的化合物分子，以及如何提高小分子吸附基团的作用效果，是这一领域所面临的新问题。上述固定化小分子的吸附材料普遍存在的缺点在于吸附剂在实际病人血浆中对目标分子吸附容量不高。这是由所选用吸附基团的性质决定的。在Noriko Hirata的报道中(Noriko Hirata，Toshiji Kuriyama，and NaokuniYamawaki，Immusorba TR and PH；Therapeutic Apheresis and Dialysis，2003，7(1)：85-90)可以看到，吸附剂基于免疫球蛋白表面广泛分布的疏水位点和整体的正电性，在不溶性亲水载体上固定化有机小分子，利用其表面分布的负电基团和疏水基团两部分共同作用吸附抗体类分子和免疫复合物。这种吸附剂对人血清白蛋白等主要蛋白没有明显的吸附作用，但是问题在于带电基团弱化了疏水作用强度，使吸附剂与目的蛋白之间的作用力减弱，造成吸附容量不高，约7mg IgG/mL吸附剂，从而单次治疗效果不明显。

发明内容