[发明专利]一种提取分离高纯度汉黄芩素的制备工艺

说明书

技术领域：

本发明属于中药成分或部位的提取分离方法，具体而言，本发明涉及中药黄芩中有效成分汉黄芩素的提取分离制备方法。

背景技术：

黄芩为常用中药，有清热泻火、解毒、止血、安胎等作用，其有效成分为黄酮类。目前从黄芩中提取并鉴定出结构的黄酮类成分已有十几种，主要包括黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素等，据文献报道汉黄芩素有抗癌、抑菌、利尿、解痉、清热、止痛等作用。但是由于现有技术落后、药材中汉黄芩素含量低，难以有效的从药材中提取分离出来高纯度的汉黄芩素。为了满足市场需求，迫切需要一种能制备高纯度汉黄芩素的提取分离工艺。本发明克服了现有技术中的不足，提供了一种提取分离高纯度汉黄芩素的制备工艺。解决了市售产品汉黄芩素含量低，难以满足市场要求的问题。

发明内容：

本发明的目的是提供一种制备高纯度的汉黄芩素的提取分离方法。成品中汉黄芩素含量高，采用高效液相法测定汉黄芩素为96％以上。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

取黄芩药材，粉碎过10目筛，加溶剂1浸泡1～30小时，滤过，药渣加入4～40倍量的提取溶剂2，40～80℃提取1～4次，每次0.5～3小时，滤过，合并滤液，减压浓缩成相对密度1.05～1.15(40℃测)的浓缩液，将浓缩液置入大孔吸附树脂分离柱中，采用湿法装柱，用蒸馏水洗涤树脂柱至水洗液呈无色，水洗液弃去，用溶剂3以进行洗脱，收集第二条黄色带的洗脱液，减压浓缩至相对密度1.05～1.15(40℃测)的浓缩液。然后采用高速逆流色谱分离浓缩液，在室温下将系统1、系统2分别置于两个分液漏斗中振摇，放置，分别取上、下相，将上相作为固定相，下相作为流动相，将固定相泵入色谱柱中，使柱中充满固定相后，再让仪器以600～1200r/min转动，同时将流动相以0～5ml/min的流速泵入。待流动相从出液端流出且两相在色谱中达到动态平衡后，将样品溶液注入色谱系统中，同时在出液端接紫外检测器。在274nm波长处对流出液连续检测，与汉黄芩素标准图谱对应，收集液蒸除溶剂，干燥，得样品。溶剂1包括但不限于水，Ph1～7的盐酸、硫酸、甲酸、醋酸、草酸等酸水。溶剂2包括但不限于水、乙醇、甲醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯等及各溶剂的混合溶剂。溶剂3包括但不限于水、乙醇、甲醇、丙酮、正丁醇等及各溶剂的混合溶剂。系统1包括但不限于水、乙醇、甲醇、氯仿、正己烷、环己烷、正丁醇、乙酸乙酯、乙醚等各溶剂的混合溶剂。系统2包括但不限于水、乙醇、甲醇、氯仿、正己烷、环己烷、正丁醇、乙酸乙酯、乙醚等各溶剂的混合溶剂。

具体实施方式：

为更好的理解本发明，下面通过具体的实施例进一步阐述本发明，但不应被理解为对本发明有任何的限制。

实施例1：取黄芩药材，粉碎过10目筛，加水浸泡4小时，滤过，药渣加入15倍量的乙醇70℃提取2次，每次2小时，，滤过，合并滤液，减压浓缩成相对密度1.05～1.15(40℃测)的浓缩液，将浓缩液置入大孔吸附树脂分离柱中，采用湿法装柱，用蒸馏水洗涤树脂柱至水洗液呈无色，水洗液弃去，用95％乙醇以进行洗脱，收集第二条黄色带的洗脱液，减压浓缩至相对密度1.05～1.15(40℃测)的浓缩液。然后采用高速逆流色谱分离浓缩液，在室温下分别将系统1(正己烷-丙酮-乙醇-水＝6∶4∶4∶9)，系统2(正己烷-正丁醇-乙醇-水＝2∶6∶5∶5)置于两个分液漏斗中振摇，放置，分别取上、下相，将上相作为固定相，下相作为流动相，将固定相泵入色谱柱中，使柱中充满固定相后，再让仪器以800r/min转动，同时将流动相以2.0ml/min的流速泵入。待流动相从出液端流出且两相在色谱中达到动态平衡后，将样品溶液注入色谱系统中，同时在出液端接紫外检测器。在274nm波长处对流出液连续检测，与汉黄芩素标准图谱对应，收集液蒸除溶剂，干燥，得样品。

实施例2：取黄芩药材，粉碎过10目筛，加1％盐酸水溶液浸泡6小时，滤过，药渣加入12倍量的85％乙醇60℃提取三次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，减压浓缩成相对密度1.05～1.15(40℃测)的浓缩液，将浓缩液置入大孔吸附树脂分离柱中，采用湿法装柱，用蒸馏水洗涤树脂柱至水洗液呈无色，水洗液弃去，用95％乙醇以进行洗脱，收集第二条黄色带的洗脱液，减压浓缩至相对密度1.05～1.15(40℃测)的浓缩液。然后采用高速逆流色谱分离浓缩液，在室温下将系统环己烷-氯仿-乙醇-水＝6∶3∶4∶8)，系统2环己烷-乙酸乙酯-乙醇-水＝3∶8∶5∶7分别置于两个分液漏斗中振摇，放置，分别取上、下相，将上相作为固定相，下相作为流动相，将固定相泵入色谱柱中，使柱中充满固定相后，再让仪器以900r/min转动，同时将流动相以1.5ml/min的流速泵入。待流动相从出液端流出且两相在色谱中达到动态平衡后，将样品溶液注入色谱系统中，同时在出液端接紫外检测器。在274nm波长处对流出液连续检测，与汉黄芩素标准图谱对应，收集液蒸除溶剂，干燥，得样品。