[发明专利]通用型基因打靶载体的构建方法有效

专利信息
申请号: 200710017948.8 申请日: 2007-05-29
公开(公告)号: CN101117636A 公开(公告)日: 2008-02-06
发明(设计)人: 陈兴启;张涌;孙达权;刘凤军;张玉玲 申请(专利权)人: 西北农林科技大学
主分类号: C12N15/63 分类号: C12N15/63
代理公司: 西安通大专利代理有限责任公司 代理人: 李郑建
地址: 712100陕西*** 国省代码: 陕西;61
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摘要:
搜索关键词: 通用型 基因 打靶 载体 构建 方法
【权利要求书】:

1、一种通用型基因打靶载体的构建方法,以neo为正选基因,以两个拷贝的HSV-tk1为负选基因,其中,在正选基因的两端加入Loxp序列,将正选基因和负选基因分别连入克隆载体pGEM-3Z;合成含有稀少酶切位点的序列,将其插入正选基因和负选基因之间,其特征在于,所述稀少酶切位点为Xba1,Sgs1,Bpu11201,Bsp14071,Nhe1,EcoR1,Not1,Loxp1,Xho1,BamH1,Sal1,Loxp2,Bsu151,Cla1,Bst11071,Pf12311,Spe1,Pst1,Sac II,含有稀少酶切位点序列的核苷酸序列为:

tctagaggcg cgccgctnag ctgtacagct agcgaattcg cggccgcata acttcgtata     60

atgtatgcta tacgaagtta tctcgaggat ccgtcgacat aacttcgtat aatgtatgct    120

atacgaagtt atcgatgtat acgtacgact agtctgcagc cgcggtctag a。           171

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