[发明专利]通用型基因打靶载体的构建方法有效
申请号: | 200710017948.8 | 申请日: | 2007-05-29 |
公开(公告)号: | CN101117636A | 公开(公告)日: | 2008-02-06 |
发明(设计)人: | 陈兴启;张涌;孙达权;刘凤军;张玉玲 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 | 代理人: | 李郑建 |
地址: | 712100陕西*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 通用型 基因 打靶 载体 构建 方法 | ||
1、一种通用型基因打靶载体的构建方法,以neo为正选基因,以两个拷贝的HSV-tk1为负选基因,其中,在正选基因的两端加入Loxp序列,将正选基因和负选基因分别连入克隆载体pGEM-3Z;合成含有稀少酶切位点的序列,将其插入正选基因和负选基因之间,其特征在于,所述稀少酶切位点为Xba1,Sgs1,Bpu11201,Bsp14071,Nhe1,EcoR1,Not1,Loxp1,Xho1,BamH1,Sal1,Loxp2,Bsu151,Cla1,Bst11071,Pf12311,Spe1,Pst1,Sac II,含有稀少酶切位点序列的核苷酸序列为:
tctagaggcg cgccgctnag ctgtacagct agcgaattcg cggccgcata acttcgtata 60
atgtatgcta tacgaagtta tctcgaggat ccgtcgacat aacttcgtat aatgtatgct 120
atacgaagtt atcgatgtat acgtacgact agtctgcagc cgcggtctag a。 171
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