[发明专利]一种肿瘤血管新生体外共培养模型无效
| 申请号： | 200710019214.3 | 申请日： | 2007-01-04 |
| 公开（公告）号： | CN101157908A | 公开（公告）日： | 2008-04-09 |
| 发明（设计）人： | 丁义涛;方胜;余德才;孙喜太 | 申请（专利权）人： | 南京大学医学院附属鼓楼医院 |
| 主分类号： | C12N5/06 | 分类号： | C12N5/06;C12N5/08;C12N11/04 |
| 代理公司： | 南京中新达专利代理有限公司 | 代理人： | 孙鸥 |
| 地址： | 210008*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 肿瘤 血管 新生 体外 培养 模型 | ||
【权利要求书】：
1.一种肿瘤血管新生体外共培养模型，其步骤如下：
(1)取肿瘤细胞充分混匀于2％海藻酸钠溶液中；
(2)通过微囊发生器，将细胞混悬液喷入100mmol/L氯化钙溶液内使其胶化；
(3)待微胶珠硬化，生理盐水洗涤；
(4)与0.1％多聚赖氨酸溶液反应后，生理盐水洗涤；
(5)再与0.15％海藻酸钠溶液反应后，生理盐水洗涤；
(6)用55mmol/L的柠檬酸钠溶液液化微囊核心后，置于CO2培养箱中培养；
(7)微囊化肿瘤细胞直接用于共培养，或冻存；
(8)取内皮细胞贴壁培养或三维生长，加入微囊化肿瘤细胞于同一培养液中，共培养。
(9)分离肿瘤细胞与内皮细胞，分别行基因和蛋白检测以及培养液细胞因子的检测。
2.根据权利要求1所述的一种肿瘤血管新生体外共培养模型，其特征在于控制截流量为小于110KD，微囊内细胞密度为105～106个细胞/ml。
3.根据权利要求1所述的一种肿瘤血管新生体外共培养模型，其特征在于步骤(8)中，内皮细胞与微囊内肿瘤细胞比例为1∶10。
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