[发明专利]固定化重组E.coli BL21－pET/aspC细胞制备L－高苯丙氨酸无效
| 申请号： | 200710021346.X | 申请日： | 2007-04-09 |
| 公开（公告）号： | CN101054570A | 公开（公告）日： | 2007-10-17 |
| 发明（设计）人： | 韦萍;贾红华;陈永生;何冰芳;欧阳平凯 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P13/22;C12R1/19 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 | 代理人： | 徐冬涛 |
| 地址： | 210009*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 固定 重组 coli bl21 pet aspc 细胞 制备 苯丙氨酸 | ||
1、一种固定化重组E.coli BL21-pET/aspC细胞制备L-高苯丙氨酸的方法，其特征在于将α-羰基苯丁酸与L-谷氨酸或L-天门冬氨酸混匀，调节pH至7.0～9.5，加入非离子型表面活性剂配成反应液，将固定化重组E.coli
BL21-pET/aspC细胞加入反应液中，在惰性气体保护下30～50℃反应4～24
h得白色混悬液，调节pH过滤得L-高苯丙氨酸；其中所述的非离子型表面活性剂为聚山梨酯-吐温系列表面活性剂。
2、根据权利要求1所述的制备L-高苯丙氨酸的方法，其特征在于α-羰基苯丁酸与L-谷氨酸按摩尔比为1:1～1.6的比例混合，固定化细胞与反应液的质量体积比为1％～5％，非离子型表面活性剂与反应液的质量体积比为0.1％～0.6％。
3、根据权利要求1或2所述的制备L-高苯丙氨酸的方法，其特征在于重组Ecoli BL21-pET/aspC细胞的固定化方法为：将聚乙烯醇溶胀后，加入海藻酸钠，灭菌锅加热使其溶化，待聚乙烯醇冷却后，加入含有重组E.coliBL21-pET/aspC菌悬液与活性炭的混合物，搅拌均匀后滴加到交联剂溶液中，形成小球状，并在交联剂溶液中浸泡3～12h，洗涤后得到固定化细胞。
4、根据权利要求3所述的制备L-高苯丙氨酸的方法，其特征在于在固定化细胞的制备中各原料按质量比计，聚乙烯醇:海藻酸钠:活性炭＝8～12:0.1～1:5～20。
5、根据权利要求3所述的制备L-高苯丙氨酸的方法，其特征在于交联剂溶液为硼砂-氯化钙溶液、硼酸-氯化钙溶液或硼酸-硼砂-氯化钙溶液。
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