[发明专利]一种氨基脲的衍生物氨基脲缩对醛基苯甲酸的合成方法

说明书

技术领域

一种呋喃西林代谢物氨基脲的衍生物氨基脲缩对醛基苯甲酸的合成方法，属于生物化工技术领域。

背景技术

氨基脲，英文名称：semicarbazide(SEM)，CAS#363634，结构式为NH₂NHCONH₂，是硝基呋喃类药物呋喃西林在动物体内的代谢产物。硝基呋喃类药物可用于防治水生动物疾病，和水生动物养殖环境的消毒；也可用于防治畜禽肠道感染，应用比较广泛。硝基呋喃类药物进入动物体内后，由于稳定性较差很快分解，以代谢物的形式与动物组织蛋白结合形成稳定的化合物。由于硝基呋喃类药物的强毒性和致癌的副作用，已引起了世界各国的高度重视并禁止使用。由于这种违禁药品的违规使用，造成在动物体内残留，但目前国内的检测技术多停留于原药的检测，关于代谢物的检测研究很少，有的也只限于仪器检测。随着国际标准的提高，我国贸易的国际化，这种检测技术已经不能满足要求，有必要研究更有效快捷的检测方法——酶联免疫技术(ELISA)，这就需要有氨基脲的衍生物。到目前为止，国内尚没有针对呋喃西林代谢物氨基脲的酶联免疫检测的衍生物报道，为了弥补这一空白，有必要合成氨基脲的衍生物。

发明内容

本发明的目的是提供一种呋喃西林代谢物氨基脲衍生物氨基脲缩对醛基苯甲酸的合成方法，以便于氨基脲的酶联免疫检测，为今后人们的研究提供了方便的途径。

本发明的技术方案：以氨基脲为原料，在搅拌下与对醛基苯甲酸反应，用硅胶薄层层析法监测反应终点，合成衍生物氨基脲缩对醛基苯甲酸(CPSEM)。其反应方程式为：

氨基脲     对醛基苯甲酸        氨基脲缩对醛基苯甲酸

工艺步骤为：

(1)合成：氨基脲与对醛基苯甲酸为等摩尔投料量，先将氨基脲用蒸馏水溶解，称取1～2g(0.013～0.027mol)的氨基脲，在安装有磁力搅拌器装置的烧杯中加入蒸馏水10mL溶解；另将对醛基苯甲酸滴加N，N-二甲基甲酰胺使溶解，称取对醛基苯甲酸2～4g(0.013～0.027mol)，缓慢滴加N，N-二甲基甲酰胺(DMF)至对醛基苯甲酸完全溶解；在搅拌下将氨基脲溶液加入对醛基苯甲酸溶液中，反应温度控制在20～30℃，反应2小时。

(2)反应终点监测：硅胶薄层层析法(TLC)监测，硅胶薄板下端1cm处作一水平线，吸取反应液1μl点于划线处，点样结束，吹干，将薄板放入层析液缸中，层析液是甲醇-氯仿混合溶剂，甲醇/氯仿体积比1∶19，展开层析至5～6cm处，取板，吹干溶剂，将薄板置于紫外分析仪中，在254nm波长观察，在R_F＝0.3～0.32观察到对应的点，作为反应终点。

(3)提纯：将反应液过滤得到白色固体，用蒸馏水洗涤然后过滤，重复2～3次，滤过料放入真空干燥箱内30℃干燥，得到衍生物氨基脲缩对醛基苯甲酸。

其所用硅胶薄层板的制作：取硅胶12g，溶解在40ml0.5％质量浓度的羟甲基纤维素钠溶液中，用玻璃棒充分搅拌成糊状，超声波振荡1分钟，均匀涂布在3cm×8cm玻璃板上，置于阴凉处自然干燥后，放入105℃的烘箱中活化1小时，然后放入干燥箱中备用。

本发明的有益效果：本发明成功合成了呋喃西林代谢物氨基脲的衍生物氨基脲缩对醛基苯甲酸，合成步骤简洁，经过后处理，纯度高达99％以上，完全可以用作标准品，为以后人们对氨基脲的酶联免疫检测研究提供了方便的途径，可以满足国内对其研究的需要。

附图说明

图1氨基脲缩对醛基苯甲酸的高效液相色谱图。

图2氨基脲缩对醛基苯甲酸的紫外吸收图。

图3氨基脲缩对醛基苯甲酸的质谱正离子图。

图4氨基脲缩对醛基苯甲酸的质谱负离子图。

具体实施方式

实施例1

(1)硅胶薄层板的制作：

取硅胶12g，溶解在40ml0.5％质量浓度的羟甲基纤维素钠溶液中，用玻璃棒充分搅拌成糊状，超声波振荡1分钟，均匀涂布在3cm×8cm玻璃板上，置于阴凉处自然干燥后，放入105℃的烘箱中活化1小时，然后放入干燥箱中备用。

(2)衍生物氨基脲缩对醛基苯甲酸(CPSEM)的合成：

称取1.5g(0.020mol)的氨基脲，在安装有磁力搅拌器装置的烧杯中加入蒸馏水10mL，对醛基苯甲酸3g(0.020mol)，缓慢滴加N，N-二甲基甲酰胺(DMF)至对醛基苯甲酸完全溶解，搅拌中加入氨基脲1g(0.013mol)的溶液，整个反应温度控制在20～30℃，反应2小时。