[发明专利]无机磷诊断/测定试剂盒及无机磷浓度测定方法

权利要求书

1.一种利用酶循环扩增法、酶比色法及酶联法技术的无机磷浓度测定方法，其方法原理如下：

磷酸根+谷氨酰胺+腺苷二磷酸谷氨酰胺合成酶氨离子

                              +谷氨酸+腺苷三磷酸

氨离子+丙酮酸+还原型辅酶丙氨酸脱氢酶L-丙氨酸+

                                        水+辅酶

丙氨酸+水+氧甘氨酸氧化酶氨离子+丙酮酸+

                                        过氧化氢

将最终反应物置于紫外/可见光分析仪或半、全自动生化分析仪下，检测主波长340nm吸光度下降的程度/速度，测算出无机磷的浓度大小测定结果。

2.一种无机磷诊断/测定试剂盒，主要成分包括：

缓冲液            20-500mmol/L

稳定剂            1-4000mmol/L

还原型辅酶        0.1-0.35mmol/L

谷氨酰胺          1-50mmol/L

腺苷二磷酸        1-50mmol/L

丙酮酸            1-50mmol/L

谷氨酰胺合成酶    1000-80000U/L

丙氨酸脱氢酶      1000-80000U/L

甘氨酸氧化酶      1000-80000U/L

其特征在于：试剂盒可以是干粉状态，在使用前加水溶解后使用；也可以配制成液体试剂，直接使用。

3.根据权利要求2所述无机磷诊断/测定试剂盒，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、谷氨酰胺、腺苷二磷酸、丙酮酸、谷氨酰胺合成酶、丙氨酸脱氢酶、甘氨酸氧化酶组成单剂试剂。

4.根据权利要求2所述无机磷诊断/测定试剂盒，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、谷氨酰胺、腺苷二磷酸、丙酮酸、谷氨酰胺合成酶、丙氨酸脱氢酶、甘氨酸氧化酶组成双剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、谷氨酰胺、腺苷二磷酸、丙酮酸组成；试剂2，由缓冲液、稳定剂、谷氨酰胺合成酶、丙氨酸脱氢酶、甘氨酸氧化酶组成。还原型辅酶、谷氨酰胺、腺苷二磷酸、丙酮酸、谷氨酰胺合成酶、丙氨酸脱氢酶、甘氨酸氧化酶在试剂1或试剂2中的位置可以不限。

5.根据权利要求2所述无机磷诊断/测定试剂盒，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、谷氨酰胺、腺苷二磷酸、丙酮酸、谷氨酰胺合成酶、丙氨酸脱氢酶、甘氨酸氧化酶组成多剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、谷氨酰胺、腺苷二磷酸、丙酮酸组成；试剂2，由缓冲液、稳定剂、丙氨酸脱氢酶、甘氨酸氧化酶组成；试剂3，由缓冲液、稳定剂、谷氨酰胺合成酶组成。还原型辅酶、谷氨酰胺、腺苷二磷酸、丙酮酸、谷氨酰胺合成酶、丙氨酸脱氢酶、甘氨酸氧化酶在试剂1、试剂2或试剂3中的位置可以不限。

6.根据权利要求2所述无机磷诊断/测定试剂盒，其特征在于：还包括稳定剂1-4000mmol/L或0.1％-100％体积比。所述稳定剂为：硫酸铵(Ammonia Sulfate)、甘油(Glycerol)、丙二醇(Propylene Glycol)、乙二醇(Ethylene glycol)及防腐剂中的至少一种。