[发明专利]胞二磷胆碱生产工艺

说明书

技术领域：

本发明涉及化工产品的生产工艺，是一种将啤酒厂生产废弃的酵母进行处理的胞二磷胆碱生产工艺。

背景技术：

现有的胞二磷胆碱生产工艺，产品的转化率和收得率低，生产过程中废弃的酵母对环境造成很大的污染，酵母资源不能得到充分利用，生产成本高。产品在生化反应后，发酵液不能有效地去除无机盐等杂质，产品的纯度低。产品色泽及蛋白难以去除，产品的澄清度不好，生产过程中存在杂菌污染问题。酒厂生产废弃的酵母的菌种的活性低，从而使产品的转化率和收得率都很低，难以达到标准要求。

发明内容：

本发明的目的是提供一种品转化率和收得率高，减少环境污染，降低成本，提高产品纯度的胞二磷胆碱生产工艺。

本发明的技术解决方案是：一种胞二磷胆碱生产工艺，其特征是：

首先进行投料：在反应罐内加入水和葡萄糖，升温到40～42℃投入酵母，发酵后加入无机盐、磷酸胆碱，待升温后，投入胞苷酸溶液，再继续升湿到40±1℃保温、反应，然后补加蔗糖，并每两小时补加一次，当转化率达80％以上时终止反应；升温到85℃，迅速用水冷却到室温，然后把反应液送压榨机压榨；压榨结束后用水顶洗，将调节PH后所得清液送入纳膜过滤器除盐；

其次，碳柱上样：压榨清液上碳柱，碳柱上样结束后，用纯水冲洗碳柱，使碳柱流出液无Cl^-；再用碱乙醇溶液将胞二磷胆碱钠洗脱下来，并在有紫外吸收物时开始收集；

将洗脱液在薄膜真空浓缩罐中进行汽化浓缩；

再其次是离子交换树脂分离：将浓缩液用水稀释至浓度为2％，上大孔离子交换树脂柱；上样结束后，水洗柱子；再用配好的1％NaCl洗脱，并将洗脱液浓缩到浓度75％；

然后进行精制：将收集到的胞二磷胆碱钠溶液加热至40度左右送至5000分子量超滤器除杂、脱色；再将脱色液用6000分子量超滤器超滤，然后加入乙醇搅拌，并放置冷库过夜；再将结晶液进行离心分离，再将湿品进行真空干燥，烘干后装袋称重密封干燥保存。

本发明中所述的在投入酵母时，充分搅拌均匀，使其发酵3～5小时再加入无机盐、磷酸胆碱，待温度升到30℃时，投入胞苷酸溶液，再继续升温到40±1℃，保温计时。反应温度控制在40±1℃，3小时后取样送分析室测转化率，然后补加蔗糖，其添加量为投料时的一半，以后，每两小时就需补加蔗糖一次，当转化率达80％以上时即可终止反应，若低于70％可延长反应时间。压榨结束后用水顶洗，直到流出液CDP-e的浓度＜10％时，停止收集。将压榨液调节PH，再压榨处理，所得清液计量总体积，并取样测定含量，计算总含量。碳柱上样时，将调好PH的压榨清液上碳柱，4小时后适当降低流速。冲洗碳柱，是用PH6.0的纯水，碳柱流出液是用1％的硝酸银检查无Cl^-。洗脱胞二磷胆碱钠，是用0.05N碱乙醇(25％乙醇)溶液，流出液用玻片取样在紫外灯下观察，看到紫外吸收物便开始收集。上样结束后，水洗柱子，检查无紫外吸收物流出时，流速可适当加快。加入乙醇搅拌时，待白色沉淀析出后再继续搅拌2小时，然后放置冷库过夜。

本发明的有益效果为：首先解决激活酵母细胞系，使磷酸胆碱胞苷酰转移酶充分游离出来，提高产品的转化率和收得率，减少生产过程中废弃的酵母对环境的污染，使酵母资源得到充分利用，生产成本明显下降。解决产品在生化反应后，发酵液如何有效地去除无机盐等杂质，提高产品的纯度。解决产品色泽及蛋白去除，提高产品的澄清度，以及生产过程中的杂菌污染问题。酵母细胞中有较强的糖酵解能力及较高的磷酸胆碱胞苷酰转移酶。根据这一特性，本发明将啤酒厂生产废弃的酵母通过补充碳源，培养，经二次发酵，添加适量的无机盐来激活酵母细胞中的磷酸胆碱胞苷酰转移酶，催化合成胞二磷胆碱钠。采用此法，能使酵母菌种的活性提高，从而产生较高的磷酸胆碱胞苷酰转移酶，使产品的转化率由80％提高到90％以上，产品的收得率由100％提高到120％。采用超滤技术，有效地去除蛋白，降低产品的色泽，有效地解决了生产过程中的杂菌污染，使产品的纯度达到99％以上，并使澄清度和热源均达到《中国药典》2005版标准要求。本发明充分利用酵母资源，将生产胞二磷胆碱钠的酵母分离后，再生产酵母抽提物或维生素D2的前体麦角甾干酵母，使生产成本下降至1500元/Kg，实现了清洁生产，减少了环境污染，体现了循环经济价值。

以下结合实施例对本发明作进一步的详细说明：

具体实施方式：

配料(以5′-胞苷酸为基数)：5′-胞苷酸1Kg，啤酒酵母30Kg，蔗糖3Kg，葡萄糖3Kg，水120Kg，磷酸胆碱5Kg。

实施例一：