[发明专利]低能离子诱变灰色变异链霉菌选育万隆霉素高产菌株的方法无效
| 申请号： | 200710028008.9 | 申请日： | 2007-05-15 |
| 公开（公告）号： | CN101092601A | 公开（公告）日： | 2007-12-26 |
| 发明（设计）人： | 林壁润;沈会芳;张晓勇;谢双大;潘群英;高向阳 | 申请（专利权）人： | 广东省农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N13/00;C12N15/01;C12R1/465 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 | 代理人： | 李卫东;裘晖 |
| 地址： | 51064*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 低能 离子 诱变 灰色 变异 霉菌 选育 万隆 霉素 高产 菌株 方法 | ||
1、一种低能离子诱变灰色变异链霉菌选育万隆霉素高产菌株的方法，其特征在于包括如下步骤：在室温下，将0.1～0.3mL灰色变异链霉菌的孢子悬浮液于无菌平皿内涂布均匀，在无菌状态下吹干，使其形成一层菌膜，采用能量为10～30Kev的氮离子束，剂量为7.8×1014～28.6×1014ions/cm2的条件下进行脉冲注入，然后用0.5～1.0mL无菌水洗下诱变处理过的菌膜，稀释至103～106倍后涂布于含0.6～1.0μg/mL链霉素的高氏一号培养基平板中，28～32℃培养7～10天，选取生长良好的单菌株接种于盛有100mL液体发酵培养基的摇瓶中，于28～32℃，160～200rpm摇床中培养96～120h，获得诱变的遗传性状稳定的纯灰色变异链霉菌；所述灰色变异链霉菌为模式菌GAAS2507，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC：M203059，保藏时间是2003年7月7日。
2、根据权利要求1所述的低能离子诱变灰色变异链霉菌选育万隆霉素高产菌株的方法，其特征在于：所述孢子悬浮液是按下述方法配制而成：取灰色变异链霉菌的斜面孢子，用无菌水制成106～108个/mL的孢子悬浮液。
3、根据权利要求1所述的低能离子诱变灰色变异链霉菌选育万隆霉素高产菌株的方法，其特征在于：所述生长良好的单菌株为菌落直径大，产孢量大的单菌株。
4、根据权利要求1所述的低能离子诱变灰色变异链霉菌选育万隆霉素高产菌株的方法，其特征在于：所述液体发酵培养基组成及质量含量为：葡萄糖6～10g，玉米浆10～15g，蛋白胨2～5g，NaCl 2～5g，CaCO3 2～5g，(NH4)2SO42～5g，溶解在1L蒸馏水中，初始pH7.2～7.4。
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