[发明专利]一种补脾益肠丸的质量检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种补脾益肠丸的质量标准检测方法，特别是涉及一种检测补脾益肠丸中芍药苷、补骨脂素和异补骨脂素含量的方法。

技术背景

补脾益肠双层丸是我厂首创的专利产品(申请(专利)号：87106202)，它采用胃肠分溶的工艺制备，具有显著的疗效。

原有的质量检测方法只有显微鉴别和薄层色谱鉴别，不能全面的反映药物的质量，并且技术含量较低。我们通过对药物内外层的研究，应用高效液相色谱，发明了一种梯度洗脱，变化检测波长的检测方法，此方法的优点是同时检测了内外层有效成分的含量，快速，简便，十分有效的保证了药物的质量，并且在现有的质量检测方法中属于技术领先水平。

发明内容

本发明的目的是提供一种补脾益肠丸的质量检测方法。利用高效液相色谱法梯度洗脱分离药物中内外层的有效成分芍药苷、补骨脂素和异补骨脂素，使有效成分能够在最佳的流动相、最大吸收波长条件下得到最精确的检验。

本发明通过以下技术方案实现：

采用高效液相色谱法：

(1)色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂以甲醇或乙腈为流动相A，以水为流动相B，分两个梯度进行洗脱，两梯度用不同的波长检测，检测方法为双波长检测法或变换波长检测法，理论板数按芍药苷峰计算应不低于2000。

(2)对照品溶液的制备  取芍药苷、补骨脂素、异补骨脂素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含芍药苷25～35μg、补骨脂素2～6μg、异补骨脂素2～6μg的混合溶液，即得。

(3)供试品溶液的制备  取供试品适量，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声40分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

(4)测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

(5)供试品每1g含白芍以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，不得少于1.1mg；含补骨脂以补骨脂素(C₁₁H₆O₃)和异补骨脂素(C₁₁H₆O₃)的总量计，不得少于0.16mg。

在上述步骤(1)的色谱条件与系统适应性试验，流动相A为甲醇梯度洗脱时，梯度1流动相的优选体积比为：A∶B＝15％～30％∶85％～55％，A+B＝100％，流速1ml/min，检测波长为220～250nm，待芍药苷峰出现后0～15分钟流动相变化到梯度2，梯度2流动相的优选体积比为：A∶B＝35％～60％∶65％～40％，A+B＝100％，流速1ml/min，检测波长为230～260nm，待补骨脂素和异补骨脂素峰出现后，继续洗脱至无杂质峰，即可。

在上述步骤(1)的色谱条件与系统适应性试验，其特征在于方法(1)中：流动相A为乙腈梯度洗脱时，梯度1流动相的体积比为：A∶B＝10％～25％∶90％～75％，A+B＝100％，流速1ml/min，检测波长为220～250nm，待芍药苷峰出现后0～15分钟流动相变化到梯度2，梯度2流动相的体积比为：A∶B＝35％～45％∶65％～55％，A+B＝100％，流速1ml/min，检测波长为230～260nm，待补骨脂素和异补骨脂素峰出现后，继续洗脱至无杂质峰，即可。

当流动相A为甲醇梯度洗脱时，优选的方案为：梯度1流动相的体积比例为A∶B＝30∶70，流速1ml/min1，检测波长230nm，待芍药苷峰出现后0～5分钟流动相变化到梯度2，梯度2流动相的体积比为：A∶B＝45∶55，流速1ml/min，检测波长246nm，待补骨脂素和异补骨脂素峰出现后，继续洗脱至无杂质峰，即可。

在上述步骤(2)的对照品溶液的制备，取芍药苷、补骨脂素、异补骨脂素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含芍药苷30μg、补骨脂素4μg、异补骨脂素4μg的混合溶液，即得。

其研究步骤和详细数据如下：

实验材料与仪器：

实验材料：补脾益肠丸(广州陈李济药厂生产)；补脾益肠丸芍药苷阴性制剂(广州陈李济药厂提供)；芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所，110736-200423)；补骨脂素(中国药品生物制品检定所，110739-200310)；异补骨脂素(中国药品生物制品检定所，110738-200309)。