[发明专利]硒化琼枝麒麟菜多糖的制备方法及应用

权利要求书

1.一种硒化琼枝麒麟菜多糖的制备方法，其特征是采用亚硒酸钠在稀硝酸的催化作用下对琼枝麒麟菜多糖进行硒化得到，包括以下步骤：

(1)提取琼枝硫酸多糖；

(2)琼枝硫酸多糖加热溶解于硝酸体积分数为0.1％～1.0％的水溶液；

(3)加入亚硒酸钠，加热到50～100℃搅拌5～12h至反应完全；

(4)冷却后，采用无水碳酸钠调节pH值为5～6，微孔滤膜过滤或离心后的溶液对水透析；

(5)步骤(4)得到的透析液中加入抗坏血酸，至溶液无红色时停止透析，减压浓缩；

(6)加入相当于步骤(5)得到的浓缩液3～5倍体积的无水乙醇进行沉淀，0～4℃低温下放置8～12h，离心，用无水乙醇洗涤沉淀物，室温干燥。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是抗坏血酸的用量为亚硒酸钠用量的2倍；所述亚硒酸钠与琼枝硫酸多糖的质量比为0.8∶1～1∶1。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征是步骤(5)所述减压浓缩是在250ml单颈圆底烧瓶装入冷却液安装在RE-52AA型旋转蒸发仪中，控温60℃，压力-0.9MPa，中速旋转蒸发。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征是步骤(1)所述提取琼枝硫酸多糖是从采自海南省琼海市麒麟菜基地的琼枝麒麟菜干品中提取，提取方法如下：将洗净晾干的琼枝麒麟菜剪碎后加入蒸馏水，置于沸水浴中搅拌提取2h，提取液温度为80～90℃，用的确良布抽滤，滤渣加沸水浴提取1～2次，每次15min，抽滤，合并滤液，用旋转蒸发仪减压浓缩至原体积的1/3～1/4，浓缩后的提取液加入3～5倍的95％乙醇，搅拌，析出沉淀，沉淀放置8～12h，抽滤，分别用无水乙醇、丙酮洗涤，室温干燥，得琼枝硫酸多糖。

5.一种硒化琼枝麒麟菜多糖的制备方法，其特征是采用亚硒酸钠在稀硝酸的催化作用下对琼枝麒麟菜多糖进行硒化得到，包括以下步骤：

(1)提取琼枝硫酸多糖；

(2)琼枝硫酸多糖加热溶解于硝酸体积分数为0.1％～1.0％的水溶液；

(3)加入亚硒酸钠，加热到50～100℃，搅拌5～12h至反应完全；

(4)冷却后，过滤，减压浓缩，加入抗坏血酸还原，用相当于还原得到的反应产物3～5倍体积无水乙醇沉淀，离心，得到红色沉淀，用无水乙醇洗涤；

(5)冷冻干燥。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征是所述抗坏血酸的用量为亚硒酸钠用量的2倍；所述亚硒酸钠与琼枝硫酸多糖的质量比为0.8∶1～1∶1。

7.根据权利要求5或6所述的方法，其特征是步骤(4)所述减压浓缩是在250ml单颈圆底烧瓶装入冷却液安装在RE-52AA型旋转蒸发仪中，控温60℃，压力-0.9MPa，中速旋转蒸发。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征是步骤(1)所述提取琼枝硫酸多糖是从采自海南省琼海市麒麟菜基地的琼枝麒麟菜干品中提取，提取方法如下：将洗净晾干的琼枝麒麟菜剪碎后加入蒸馏水，置于沸水浴中搅拌提取2h，提取液温度为80～90℃，用的确良布抽滤，滤渣加沸水浴提取1～2次，每次15min，抽滤，合并滤液，用旋转蒸发仪减压浓缩至原体积的1/3～1/4，浓缩后的提取液加入3～5倍的95％乙醇，搅拌，析出沉淀，沉淀放置8～12h，抽滤，分别用无水乙醇、丙酮洗涤，室温干燥，得琼枝硫酸多糖。

9.权利要求1-8之一所述方法制备的硒化琼枝麒麟菜多糖在制备抑制人体癌细胞药物中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征是在制备抑制人喉上皮细胞癌HEp-2细胞、人白血病K562细胞和人肺癌H-460细胞、结肠癌细胞LOVO或宫颈癌细胞Hela药物中的应用。