[发明专利]硒化琼枝麒麟菜多糖的制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种化学合成方法，具体涉及硒化琼枝麒麟菜多糖的制备方法及应用。

背景技术

硒与机体免疫功能、抗氧化能力等密切相关。适当增加硒的摄入量，对改善机体免疫功能、增强抗癌能力、维持身体健康和预防某些疾病的发生等方面都具有明显的作用。在我国，克山病和大骨节病的发病区均处于低硒地带，而且补硒已经成了对克山病和大骨节病防治的一种有效措施。硒还是一些酶活性部位的基本组成部分，在体内以硒代半胱氨酸形式参与谷胱甘肽过氧化物酶、碘化甲腺原氨酸脱碘酶等多种蛋白质的形成，能有效清除活性氧自由基，防止细胞损伤，具有重要的生理学作用。研究还表明，美国低硒地区心血管疾病死亡率比高硒地区明显高。这主要与硒的抗脂质过氧化有关。有关硒的临床也用研究表明，硒对癌症有一定抑制作用，是化疗和放疗的良好辅助药物。而且，硒具有抗氧化特性和清除自由基的作用，这对预防衰老有积极作用。硒对慢性乙型肝炎的治疗具有一定的作用，可以明显改善慢性乙肝病人乏力等症状。

同时，硒又是极毒元素，零价硒有灰色、黑色和红色三种形态，灰色和黑色零价硒为粉末状态，不溶于水，营养剂量范围小，使用时剂量难以控制。但是将其制备成纳米颗粒后，从黑色变为红色；从不溶于水变为透明胶体溶液，显示出了高活性与低毒性。

许多天然多糖和化学合成的多糖能抑制多种病毒，如艾滋病毒、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、流感病毒、白血病病毒和反转录病毒等。尤其是硫酸化多糖，因为是一类多聚阴离子，带有负电荷，能与病毒外膜糖蛋白上带有正电荷的氨基酸残基相互作用，且在结构上与细胞表面糖胺聚糖-硫酸乙酰肝素类似，能以受体竞争抑制方式阻止病毒与寄主细胞结合，同时它又含有许多细胞表面分子的模拟配体，能够直接与细胞结合，阻碍病毒吸附。因此，可干扰反转录病毒及其他病毒的吸附和侵入，抑制各种反转录病毒的逆转录酶活性以及病毒抗原的表达和病毒合胞体的形成。

硒多糖引起了人们的极大兴趣。目前，硒多糖的制备方法主要有两种即生物富集法和化学合成法，生物富集法的缺点是制备周期长，条件不易控制，大批量生产可行性困难。化学合成法有专利CN 1014522B《硒化卡拉胶的制法》，用浓硝酸溶解硒粉然后与角叉菜胶反应得到了一种有机硒多糖-硒化角叉菜胶，其不足之处在于单质硒粉与浓硝酸会生成有毒的硒化氢，同时也产生浓硝酸的分解产物，对环境有较大的污染，且硒含量较低；另一个是专利CN 1121414C《硒化多糖化合物及其制备方法》，将多糖与亚硒酸或其盐在酸性溶液中经钡离子催化，并加热反应数小时后得到硒多糖，然后用稀硫酸除去反应液中的钡离子，过滤后的溶液加入氯化铁溶液，NH₃-NH₄Cl调节pH值，除去未反应的亚硒酸根离子进行提纯，存在使用有毒的钡离子、后处理繁琐、不能充分利用亚硒酸盐等不足。

发明内容

本发明的目的是提供一种硒化琼枝麒麟菜多糖的制备方法。

本发明的另一个目的是提供所述方法制备的硒化琼枝麒麟菜多糖的应用。

本发明的硒化琼枝麒麟菜多糖的制备方法，是采用亚硒酸钠在稀硝酸的催化作用下对琼枝麒麟菜多糖进行硒化得到，包括以下步骤：

(1)提取琼枝硫酸多糖；

(2)琼枝硫酸多糖加热溶解于硝酸体积分数为0.1％～1.0％的水溶液；

(3)加入亚硒酸钠，加热到50～100℃搅拌5～12h至反应完全；

(4)冷却后，采用无水碳酸钠调节pH值为5～6，微孔滤膜过滤或离心后的溶液对水透析；

(5)步骤(4)得到的透析液中加入抗坏血酸，至溶液无红色时停止透析，减压浓缩；

(6)加入相当于步骤(5)得到的浓缩液3～5倍体积的无水乙醇进行沉淀，0～4℃低温下放置8～12h，离心，用无水乙醇洗涤沉淀物，室温干燥。

优选方案如下：步骤(5)中抗坏血酸的用量为亚硒酸钠用量的2倍；所述亚硒酸钠与琼枝硫酸多糖的质量比为0.8∶1～1∶1。

所述减压浓缩是在250ml单颈圆底烧瓶装入冷却液安装在RE-52AA型旋转蒸发仪中，控温60℃，压力-0.9MPa，中速旋转蒸发。