[发明专利]一种葡甘露聚糖酶的制备方法

权利要求书

1.一种葡甘露聚糖酶的制备方法，其特征包括以下的步骤：

(1)菌种培养：选用绿色木霉(Trichoderma viride)CGMCC 3.2942为产酶菌株，斜面培养基培养菌种，得斜面菌种；

(2)菌曲培养：将斜面菌种以常规方法制成孢子悬液，并按培养基干重计，每100g固体曲培养基接入孢子悬液8～15mL的接种量进行接种，27～30℃下恒温培养3～5天，得到菌曲，所用的固体曲培养基由质量比为1∶2.2～2.3的固体培养基和营养盐水组成，其中的固体培养基以总质量分数100％计，由蔗渣65％～73％，麸皮15％～20％，酵母细胞壁10％～15％，魔芋精粉2.0％～4.0％组成，营养盐水以总质量分数100％计，含硫酸铵0.45％～0.60％，磷酸二氢钾0.046％～0.060％，硫酸镁0.02％～0.03％，余量为水；

(3)酶液提取：将菌曲恒温浸提，过滤除渣，滤液离心去沉淀得上清液为粗酶液；

(4)沉淀酶泥：将粗酶液于冰浴中加入冷冻乙醇，沉淀分离，去上清乙醇，留沉淀，得粗酶泥；

(5)提纯：将粗酶泥用溶酶洗液溶解后，去沉淀，得葡甘露聚糖酶提纯浓酶液。

2.根据权利要求1所述的一种葡甘露聚糖酶的制备方法，其特征是步骤(1)所述的斜面培养基以质量份数计，由蔗渣6份，麸皮1份，酵母细胞壁1份，魔芋精粉0.5份，硫酸铵2份，磷酸二氢钾1份，硫酸镁0.05份，琼脂1.5份和水100份组成；步骤(3)中所述的恒温浸提的温度是28～32℃；步骤(4)中所述的冰浴温度是-4～-12℃。

3.根据权利要求1或2所述的一种葡甘露聚糖酶的制备方法，其特征是步骤(5)所述的葡甘露聚糖酶提纯浓酶液通过冷冻干燥，得到粉状葡甘露聚糖酶。