[发明专利]一种检测围产期疾病遗传易感风险的试剂盒无效
申请号: | 200710037173.0 | 申请日: | 2007-02-06 |
公开(公告)号: | CN101240323A | 公开(公告)日: | 2008-08-13 |
发明(设计)人: | 冯哲民;邹祖烨 | 申请(专利权)人: | 上海主健生物工程有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 200433上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 产期 疾病 遗传 风险 试剂盒 | ||
1. 一种检测围产期疾病遗传易感风险的试剂盒,其特征在于:包括检测血管紧张素转换酶基因(ACE)上rs4646994号I/D多态性基因型的电泳检测引物对、检测5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)上rs1801133号SNP位点、G蛋白3亚单位基因基因(GNB3)上rs5443号SNP位点、肿瘤坏死因子基因(TNF-α)上rs1800629号SNP位点的特异性引物对及特异性荧光探针对、Taq酶、dNTP混合液、MgCl2溶液、荧光定量PCR反应缓冲液、PCR反应缓冲液、去离子水等。
2. 根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述的电泳检测引物对是指针对ACE基因上rs4646994号I/D而设计,能通过电泳技术特异性扩增检测出这个位点基因型的电泳检测引物对。
3. 根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述的特异性引物对是指针对MTHFR基因上rs1801133号SNP位点、GNB3基因上rs5443号SNP位点、TNF-α基因上rs1800629号SNP位点这3个SNP位点,能特异性扩增出包含这3个SNP位点的DNA片段的引物对。
4. 根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述的特异性荧光探针对是指针对MTHFR基因上rs1801133号SNP位点、GNB3基因上rs5443号SNP位点、TNF-α基因上rs1800629号SNP位点这3个SNP位点而设计,能通过荧光定量PCR技术特异性检测出这3个SNP位点基因型的Taqman探针对。
5. 根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所含的电泳检测引物对选自具有SEQ ID NO:1和2所示序列的引物对。
6. 根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所含的特异性引物对选自具有SEQ ID NO:3和4、5和6、7和8所示序列的引物对。
7. 根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所含的特异性荧光探针选自具有SEQ ID NO:9和10、11和12、13和14所示序列的Taqman探针对。
8. 根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于试剂盒的组分和含量包括:
1)荧光定量PCR反应套装:10X荧光定量PCR反应缓冲液3μl,25mM dNTP混合液0.3μl,25mM MgCl2溶液1.8μl,5units/μl Taq DNA聚合酶0.75μl,20μM特异性引物对每条引物各0.225μl,10μM特异性荧光探针对每条探针各0.25μl,去离子水15.975μl。
2)PCR反应套装:10X PCR反应缓冲液2.5μl,25mM dNTP混合液0.2μl,25mM MgCl2溶液1.5μl,5units/μl Taq DNA聚合酶0.125μl,20μM特异性引物对每条引物各0.25μl,去离子水19.175μl。
本试剂盒供一人份检测应用,试剂盒的保存温度为-20℃。
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