[发明专利]一种土壤DNA样品制备试剂盒及其制备方法

权利要求书

1. 一种土壤DNA样品制备试剂盒，包括盒体和隔板，其特征在于：盛有溶液I的试剂瓶A，盛有溶液II的试剂瓶B，盛有溶液III的试剂瓶C，盛有溶液IV的试剂瓶D，盛有悬液V的试剂瓶E，内含酸洗玻璃珠的离心管F，微型过滤器G，PCR(链式聚合酶反应)管H。

2. 根据权利要求1所述的一种土壤DNA样品制备试剂盒，其特征在于：溶液I为120mmol/l的磷酸盐缓冲液；溶液II的配比组成为Tris·HCl 10mmol/l，EDTA 1mmol/l，CTAB 0.2％，pH8.0；溶液III为5mol/l的醋酸铵；溶液IV为异丙醇；悬液V的配比组成是质量体积比为2％的Sephadex G75；酸洗玻璃珠0.5g，直径约0.2mm；PCR管H的体积为200μl，内盛有DNA引物各0.25μmol，Taq酶2U，4种dNTP各200μmol，1×PCR反应缓冲液100ul，冷冻干燥所得。

3. 根据权利要求1所述的一种土壤DNA样品制备试剂盒，其特征在于：离心管F为2ml的离心管。

4. 根据权利要求1所述的一种土壤DNA样品制备试剂盒，其特征在于：所有试剂与耗材均经无菌处理。

5. 根据权利要求1所述的一种土壤DNA样品制备试剂盒，其特征在于：所述的异丙醇保存在棕色试剂瓶中。

6. 土壤DNA样品制备步骤如下：

A)选择用于实验的环境土壤样品；

B)将用于步骤A)中的农田土壤经细胞裂解液裂解后，获得土壤中的所有微生物的基因组DNA；

C)将步骤B)获得的基因组DNA纯化后作为PCR扩增的模板；

D)选择一般用于原核生物16SrRNA(16S核糖体核糖核酸)基因扩增的通用引物对；

E)在步骤D)选择的通用引物对的正向引物的一端加上GC发卡结构；

F)按照设计的PCR反应条件进行PCR扩增；

G)将步骤F)所述的PCR扩增产物作为样品保存备用。