[发明专利]从鲨鱼皮分离纯化生物医药用胶原蛋白的方法有效
申请号: | 200710040590.0 | 申请日: | 2007-05-14 |
公开(公告)号: | CN101307093A | 公开(公告)日: | 2008-11-19 |
发明(设计)人: | 周培根;缪辉南;吴文惠;何培民;蔡春尔;李燕 | 申请(专利权)人: | 上海水产大学 |
主分类号: | C07K1/16 | 分类号: | C07K1/16;C07K2/00 |
代理公司: | 上海智力专利商标事务所 | 代理人: | 瞿承达 |
地址: | 200090*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鲨鱼 分离 纯化 生物医药 胶原 蛋白 方法 | ||
1.一种从鲨鱼皮中分离纯化生物医学用胶原蛋白的方法,其特征在 于选取原料为鲨鱼皮,制备方法如下:
(1)、将鲨鱼皮用浓度为10mM,pH值为7.4-7.6的磷酸氢二钠缓冲液浸泡 冲洗去掉鳞和残肉,并切成小块,再用去离子水浸泡冲洗3~5次;
(2)、清洗干净的鱼皮且用原料量五倍的浓度为100mM,pH值为7.4-7.6 的磷酸氢二钠缓冲液浸泡70~75小时后,匀浆15min,在温度为4℃,转速 为10000rpm,离心15min,取上清液;
(3)、再沉淀重复(2)的过程一次,合并上清液,加硫酸铵至饱和度80 %,在温度为4℃,转速为8000rpm,离心15min,保留沉淀;
(4)、将沉淀溶在浓度为200mM,pH值为7.0的磷酸缓冲液中;
(5)、用G-75,G-100,G-150葡聚糖层析上述溶解液,收集蛋白溶出液 于温度为4℃,转速为10000rpm,离心15min,上清液浓缩,冷冻干燥后得 到生物医学用胶原蛋白。
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