[发明专利]以GST-hDSL重组蛋白增殖人造血干细胞及祖细胞的方法

权利要求书

1、一种以GST-hDSL重组蛋白增殖人造血干细胞及祖细胞的方法，其特征在于，具体步骤包括：

(1)从髓、外周血或脐带血中取样，用密度梯度离心分离出单核细胞，然后用CD34分离试剂盒对CD34细胞进行标记，采用免疫磁珠技术对CD34细胞进行纯化，得到CD34⁺细胞；

(2)采用含10％-20％胎牛或人血清的细胞培养基对上述CD34⁺细胞进行培养，加入细胞因子，加入蛋白，培养1周，换入细胞培养基，并重新加入蛋白再继续培养扩增1周，得到增殖了的造血干细胞、祖细胞。

2、如权利要求1所述的以GST-hDSL重组蛋白增殖人造血干细胞及祖细胞的方法，其特征是，所述的加入细胞因子，是指：加入粒-巨噬细胞集落刺激因子和干细胞生长因子两种细胞因子。

3、如权利要求1所述的以GST-hDSL重组蛋白增殖人造血干细胞及祖细胞的方法，其特征是，所述的加入蛋白，是指：加入浓度为5ug/ml-50ug/ml的GST-hDSL重组蛋白。

4、如权利要求1所述的以GST-hDSL重组蛋白增殖人造血干细胞及祖细胞的方法，其特征是，所述的换入细胞培养基，是指：换入含10％-20％胎牛或人血清的新鲜细胞培养基。

5、如权利要求1所述的以GST-hDSL重组蛋白增殖人造血干细胞及祖细胞的方法，其特征是，所述的重新加入重组蛋白，是指：重新加入粒-巨噬细胞集落刺激因子和干细胞生长因子两种细胞因子和5ug/ml-50ug/ml的GST-hDSL重组蛋白。

6、如权利要求2或者5所述的以GST-hDSL重组蛋白增殖人造血干细胞及祖细胞的方法，其特征是，所述的细胞因子，包括5ng/ml-15ng/ml的粒-巨噬细胞集落刺激因子和10ng/ml-30ng/ml干细胞生长因子。