[发明专利]月季RcHsp17.8编码序列及其应用无效
申请号: | 200710041158.3 | 申请日: | 2007-05-24 |
公开(公告)号: | CN101100668A | 公开(公告)日: | 2008-01-09 |
发明(设计)人: | 胡永红;明凤;蒋昌华 | 申请(专利权)人: | 上海植物园;复旦大学 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/70;C12N1/21;C12Q1/68 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人: | 陆飞;盛志范 |
地址: | 20023*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 月季 rchsp17 编码 序列 及其 应用 | ||
1.一种分离出的DNA分子,其特征在于,是月季RcHsp17.8基因,长度为465bp,具有SEQ IDNO.1所示的核苷酸序列。
2.如权利要求1所述的DNA分子,其特征在于,其编码具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的多肽。
3.一种将如权利要求1所述的DNA分子的核苷酸序列转入大肠杆菌以提高其温度耐受性的方法,具体操作步骤为:
(1)将编码具有月季RcHsp17.8基因的开放阅读框可操作地连接于原核表达载体,形成含有该基因的原核表达载体;
(2)将步骤(1)中的表达载体转入大肠杆菌细胞;
(3)通过筛选,PCR鉴定,获得转化细胞并最终再生转基因菌株。
4.一种用于检测样品中月季RcHsp17.8基因拷贝数的方法,其特征在于包括SEQ IDNO.1序列中的部分序列与样品杂交,然后检测探针是否发生了结合;其中,所述样品是月季基因组DNA,经限制性内切酶酶切后的核苷酸序列。
5.用于鉴定含重组子的大肠杆菌阳性克隆的核酸分子,其特征在于包含SEQ ID NO.1所示的DNA分子中1-20个连续的核苷酸和446-465个连续核苷酸的反向互补序列。
6.一种用于检测样品中是否存在月季RcHsp17.8基因核苷酸序列的方法,其特征在于包括用包含SEQ ID NO.1所示的DNA分子中1-20个连续的核苷酸和446-465个连续核苷酸的反向互补序列与样品进行PCR反应,然后检测是否扩增出目的片段;这里,所述样品为转基因大肠杆菌菌株。
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