[发明专利]全封闭式无菌细胞培养方法

权利要求书

1.一种全封闭式无菌细胞培养方法，其特征在于，对进入细胞培养区 域的人员、物体、空气分别进行无菌化处理，所述的细胞培养区域为全封闭 式；其中，所述的人员无菌化处理步骤为：操作人员进入细胞培养区域之前 依次进行体检、沐浴、泡手灭菌，然后穿戴无菌工作服；所述的体检为：口 腔：扁桃体无红肿化脓；手及手臂：皮肤完好无破损；全身：无化脓感染创 口，无呼吸道感染症状；严禁佩戴首饰和使用化妆品；所述沐浴为采用常水 冲淋全身，使用清洁剂进行皮肤清洗，冲淋时间不得少于7分钟；所述泡手 灭菌为进入第一更衣室，将手及手臂至肘部浸入1‰新洁而灭溶液或75％酒精， 不得短于5分钟，浸泡完毕用无菌毛巾擦干；进入第二更衣室穿戴无菌工作 服时，手不能触摸自体任何体表部位，佩戴无菌口罩时，手不能接触鼻，口 腔，面颊部位；所述的物体无菌化处理步骤为对物体进行消毒或灭菌；所述 的空气无菌化处理步骤为：空气新风补充量控制在30％±5％；对于新风口防尘 无纺布、中效空气过滤器和高效空气过滤器定期更换。

2.根据权利要求1所述的全封闭式无菌细胞培养方法，其特征在于， 所述细胞培养方法还包括独立的细胞预处理步骤，使进入细胞培养区域的细 胞无污染。

3.根据权利要求1所述的全封闭式无菌细胞培养方法，其特征在于， 所述的中效空气过滤器每半年更换一次。

4.根据权利要求1所述的全封闭式无菌细胞培养方法，其特征在于， 所述的高效空气过滤器每年更换一次。

5.根据权利要求1所述的全封闭式无菌细胞培养方法，其特征在于， 所述的新风口防尘无纺布每两周更换一次。

6.根据权利要求1所述的全封闭式无菌细胞培养方法，其特征在于， 所述的空气无菌化还包括：细胞培养结束后，开启负离子发生器，运行30- 90分钟。

7.根据权利要求1或6所述的全封闭式无菌细胞培养方法，其特征在 于，所述的空气无菌化还包括对细胞培养区域进行沉降菌检测。

8.根据权利要求2所述的全封闭式无菌细胞培养方法，其特征在于， 所述的细胞预处理区域的空气压强相对于周边环境处于负压状态。

9.根据权利要求2或8所述的全封闭式无菌细胞培养方法，其特征在 于，在所述的细胞预处理步骤中，对于有污染的细胞进行原位消毒灭菌。