[发明专利]固相多肽合成Exenatide的制备方法

权利要求书

1.一种固相多肽合成Exenatide的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）制备Fmoc-Ser(tBu)-树脂

称取Rink Amide MBHA树脂100克，装入SHYM-25多肽合成仪中，用1000mlDMF浸泡30分钟，加入Fmoc-Ser(tBu)-OH 58g，HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干；

（2）制备Fmoc-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（1）的Fmoc-Ser(tBu)-树脂中，加入脱帽试剂800ml，25℃反应30分钟，抽干，用DMF、甲醇、DMF各洗涤数次，抽干，加入Fmoc-Pro-OH 52g、HBTU 58g、HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次抽干，获得Fmoc-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（3）制备Fmoc-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（2）的Fmoc-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入脱帽试剂 800ml，25℃反应30分钟，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Pro-OH 52g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

Fmoc-Pro-OH的摩尔数为树脂的2~5倍；

（4）制备Fmoc-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（3）的Fmoc-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，25℃反应30分钟，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Pro-OH 52g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解的混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

Fmoc-Pro-OH的摩尔数为树脂的2~5倍；

（5）制备Fmoc-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（4）的Fmoc-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Ala-OH 48g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

Fmoc-Ala-OH的摩尔数为树脂的2~5倍；

（6）制备Fmoc-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（5）的Fmoc-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Gly-OH 46g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（7）制备Fmoc-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（6）的Fmoc-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Ser(tBu)-OH 58g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，抽干，获得Fmoc-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（8）制备Fmoc-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（7）的Fmoc-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Ser(tBu)-OH 58g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，抽干，获得Fmoc-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro- Pro-Ser(tBu)-树脂；

（9）制备Fmoc-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（8）的Fmoc-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Pro-OH 52g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Pro-Ser(tBu) -Ser(tBu)-Gly-Ala- Pro -Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（10）制备Fmoc-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（9）的Fmoc-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Gly-OH 46g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro- Pro-Ser(tBu)-树脂；

（11）制备Fmoc-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（10）的Fmoc-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly -Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Gly-OH 46g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala -Pro-Pro -Pro-Ser (tBu)-树脂；

（12）制备Fmoc-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro- Ser (tBu)-树脂

在步骤（11）的Fmoc-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu) -Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Asn(Trt)-OH 90g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Asn(Trt)-Gly-Gly -Pro -Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro- Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（13）制备Fmoc-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro –Pro -Ser(tBu)-树脂

在步骤（12）的Fmoc-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro- Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Lys(Boc)-OH 72g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（14）制备Fmoc-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro -Pro -Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（13）的Fmoc-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu) -Gly-Ala-Pro -Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Leu-OH 54g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Leu- Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro -Pro-Ser (tBu)-树脂；

（15）制备Fmoc-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly- Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（14）的Fmoc-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly -Ala -Pro-Pro -Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Trp(Boc)-OH 64g、HBTU  58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro -Pro - Ser(tBu)-树脂；

（16）制备Fmoc-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser (tBu) -Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（15）的Fmoc-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu) -Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Glu(OtBu)-OH 64g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly- Ala -Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（17）制备Fmoc-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro- Ser (tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（16）的Fmoc-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser (tBu) -Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Ile-OH 54g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)- Gly -Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（18）制备Fmoc-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro -Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（17）的Fmoc-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly –Pro -Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Phe-OH 58g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)- Asn(Trt)-Gly- Gly-Pro-Ser (tBu) -Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（19）制备Fmoc-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly- Pro -Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（18）的Fmoc-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt) -Gly-Gly- Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Leu-OH 54g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly- Gly-Pro- Ser(tBu) -Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（20）制备Fmoc-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly -Gly -Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（19）的Fmoc-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt) -Gly -Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Arg(Pbf)-OH 98g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)- Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro - Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（21）制备Fmoc-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt) -Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（20）的Fmoc-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc) -Asn (Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Val-OH 52g、HBTU 58g，HOBT   21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu- Lys(Boc) -Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro- Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（22）制备Fmoc-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)- Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（21）的Fmoc-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys (Boc) -Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Ala-OH 48g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp (Boc)-Leu-Lys (Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro -Pro-Pro- Ser (tBu)-树脂；

（23）制备Fmoc-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu- Lys(Boc) -Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（22）的Fmoc-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc) -Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Glu(OtBu)-OH 64g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)- Leu-Phe-Ile -Glu(OtBu)-Trp(Boc) -Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)- Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（24）制备Fmoc-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc) -Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（23）的Fmoc-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu) -Trp(Boc) -Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Glu(OtBu)-OH 64g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Glu(OtBu)-Glu(OtBu) -Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（25）制备Fmoc-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu (OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（24）的Fmoc-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)- Leu-Phe -Ile-Glu(OtBu) -Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Glu(OtBu)-OH 64g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Glu(OtBu) -Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)- Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（26）制备Fmoc-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile –Glu (OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（25）的Fmoc-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe -Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Met-OH 56g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Met -Glu(OtBu)-Glu(OtBu) -Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf) -Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu -Lys(Boc)-Asn(Trt)- Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（27）制备Fmoc-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu -Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（26）的Fmoc-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu -Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Gln(Trt)-OH 92g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Gln(Trt) -Met-Glu(OtBu) -Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile -Glu(OtBu)-Trp(Boc) -Leu-Lys(Boc) -Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro- Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala -Pro -Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（28）制备Fmoc-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val- Arg (Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（27）的Fmoc-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf) -Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Lys(Boc)-OH72g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu- Phe -Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala- Pro - Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（29）制备Fmoc-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala- Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu) -Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（28）的Fmoc-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala -Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Ser(tBu)-OH 58g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Ser(tBu)-Lys(Boc) -Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)- Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（30）制备Fmoc-Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)- Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（29）的Fmoc-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu (OtBu)-Glu(OtBu) -Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Leu-OH 54g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val -Arg(Pbf) -Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)- Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（31）制备Fmoc-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu) -Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（30）的Fmoc-Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)- Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Asp(OtBu)-OH 62g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt) -Met-Glu(OtBu)- Glu (OtBu)- Glu (OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)- Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（32）制备Fmoc-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu) -Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（31）的Fmoc-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu) -Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Ser(tBu)-OH 58g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu) -Lys(Boc) -Gln(Trt)-Met -Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)- Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（33）制备Fmoc-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met- Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（32）的Fmoc-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met -Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Thr(tBu)-OH 60g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)- Leu-Ser(tBu) -Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)- Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（34）制备Fmoc-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met -Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（33）的Fmoc-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu)-Lys (Boc)-Gln(Trt) -Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Phe-OH 58g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Leu -Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt) -Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)- Leu- Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（35）制备Fmoc-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)- Gln (Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（34）的Fmoc-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)- Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Thr (tBu)-OH 60g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Thr(tBu) -Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu) -Asp(OtBu) -Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala- Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（36）制备Fmoc-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc) -Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（35）的Fmoc-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Leu-Ser (tBu)- Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Gly-OH 46g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Gly-Thr(tBu) -Phe-Thr (tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)- Glu (OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（37）制备Fmoc-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu) -Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（36）的Fmoc-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)- Leu-Ser(tBu)- Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Glu(OtBu)-OH 64g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Glu(OtBu)-Gly -Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met- Glu (OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（38）制备Fmoc-Gly-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp (OtBu)-Leu -Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（37）的Fmoc-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu) -Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入800ml脱帽试剂，反应，抽干，用DMF洗涤，抽干，加入Fmoc-Gly-OH 46g、HBTU 58g，HOBT 21g，用1000ml接肽试剂溶解混合物，25℃反应1小时，抽干，分别用DMF、甲醇、DMF洗涤数次，抽干，获得Fmoc-Gly-Glu(OtBu)-Gly -Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Leu-Ser(tBu)-Lys (Boc) -Gln(Trt)-Met-Glu (OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe- Ile- Glu(OtBu) -Trp(Boc)-Leu-Lys (Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro- Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂；

（39）制备Fmoc-His(Trt)-Gly-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu) -Asp(OtBu) -Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂

在步骤（38）的Fmoc-Gly-Glu(OtBu)-Gly-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu) -Leu-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Met-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ala-Val-Arg(Pbf)-Leu-Phe-Ile-Glu(OtBu)-Trp(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Gly-Gly-Pro-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser(tBu)-树脂中，加入预冷至0℃的切肽试剂：TFA/EDT/H2O/TIS＝1260ml/56ml/35ml/14ml，25℃反应3小时，减压除溶剂后，加入1500ml乙醚沉淀，收集沉淀物，用乙醚洗，在室温，置干燥器中，P₂O₅存在下减压干燥12小时，获得切肽后的Exenatide粗品，100g；

将Exenatide粗品溶于重量浓度为5%乙酸中，过滤，滤液经C18柱纯化，流动相：0.2M醋酸盐缓冲液∶乙腈为7.5∶2.5，体积比；流速为350ml/min；检测波长为：280nm；用液相色谱仪跟踪收集所需要的流出液，样品峰合并后去盐，冻干，获得产品12.2g，总收率为9.7%；

所说的接肽试剂为：NMM：DMF=1：5~15，体积比；

所说的脱帽试剂为：PIP：DMF=1：2~5，体积比。