[发明专利]一种快速定量检测C－反应蛋白的胶体金法及其应用

权利要求书

1.一种非诊断目的的快速定量检测C－反应蛋白CRP的胶体金法，其特征在于：待测样品经 40－480倍稀释后与适当比例的抗C－反应蛋白的免疫胶体金在液相均质介质中充分混和均 匀，再转加到反应板上,其中，所述的反应板中包被反应板上硝基纤维膜的是针对与缀合胶 体金的抗C－反应蛋白的单抗不同反应决定簇的另一纯化CRP单抗；具体包括下列步骤：

（1）从冷藏处取出抗CRP金标液冻干品，室温至少平衡半小时，在抗CRP金标液冻干品中，准 确加入规定体积的冻干品复溶液摇匀；所述复溶液为含0.5mg NaN₃/ml纯净水；所述的抗CRP 金标液中包被胶体金的是纯化CRP单抗；

（2）吸取复溶后的金标液，加入空的反应管；

（3）待测样品加入样品稀释液进行40－480倍稀释，充分混匀；所述稀释液为甘氨酸-NaOH 缓冲液，离子强度20-200mM/L，pH 7.0-8.0；

（4）将反应板平放于实验台上，于反应孔内滴加封闭液，待完全渗入；所述封闭液为50mM PBS，含1%BSA小牛血清白蛋白，pH7.4－7.6；

（5）吸取稀释样品到反应管金标液中，充分混匀后将反应混合物全部加入到封闭后的反应板 孔中；

（6）待完全渗入后，加入洗涤液；所述洗涤液为0.01M PBS溶液1000ml,含Tween-20 1ml， NaN₃ 1.5g，pH7.6；

（7）待洗涤液完全渗入后，测读CRP值。

2.如权利要求1所述的一种非诊断目的的快速定量检测CRP的胶体金法，其特征在于：步骤 （3）中的甘氨酸-NaOH缓冲液pH 7.4-7.6。

3.如权利要求1所述的一种非诊断目的的快速定量检测CRP的胶体金法，其特征在于：步骤 （3）中待测样品加入样品稀释液进行160倍稀释。