[发明专利]一种哺乳动物细胞rep表达质粒p5RCM1及其制备方法和应用无效
| 申请号： | 200710046169.0 | 申请日： | 2007-09-20 |
| 公开（公告）号： | CN101157919A | 公开（公告）日： | 2008-04-09 |
| 发明（设计）人： | 陈金中;岳扬波;姚纪花;田聆;薛京伦 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;C12N15/85;A61K48/00 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人： | 陆飞;盛志范 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 哺乳动物 细胞 rep 表达 质粒 p5rcm1 及其 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种顺式元件P5M273，其特征在于由下述方法制备获得：将DNA序列为SEQ.NO1的野生P5中的RBE通过定向突变，使其保留rep负反馈作用，但是失去自身整合到宿主AAVS1位点的能力，其DNA序列为SEQ.NO2。
2.一种具有负反馈调节与防自身整合的哺乳动物细胞rep表达质粒p5RCM273，其特征在于由下述方法制备获得：采用基于PCR的定点突变技术，向质粒p5RC的p5启动子导入RBE突变，突变后原质粒的p5启动子区序列SEQ.NO1：P5IEE变为p5M273启动子序列SEQ.NO2：P5M273，在新质粒中p5RCM273中rep的表达由p5M273启动子控制。
3.一种如权利要求1所述的顺式元件P5M273在构建基因表达操作体系中的应用。
4.一种如权利要求2所述的rep表达质粒p5RCM273在病毒包装操作，基因操作或基因治疗中的应用。
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