[发明专利]朱顶红无菌苗再切割成苗方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种朱顶红无菌苗再切割成苗方法，提高朱顶红组培苗的繁殖与生长速率，属于农业生物技术中的园林植物与观赏园艺领域。

背景技术

朱顶红(Hippeastrum)别名孤挺花、华胄兰、百子莲等，是石蒜科孤挺花属多年生草本植物，原产秘鲁和巴西一带，是世界各地广泛应用的观赏球根花卉。我国在1912～1949年期间，南京、上海等地已有朱顶红的盆栽观赏。但高档朱顶红繁殖困难，我国朱顶红种球一直依赖从荷兰等国进口。目前，通过组织培养或鳞茎扦插繁殖是国际上朱顶红快速繁殖的主要技术手段。

朱顶红的鳞茎、叶片和花葶都能经过诱导能产生幼苗。多年来，学者们一直在研究最佳的诱导培养基。虽然不同的品种需要不同的配方，但是他们的诱导方式相似，添加的激素也相似，只是浓度不同而已。诱导培养基为：MS+BA(6-苄基氨基腺嘌呤)2～4mg/L+NAA(萘乙酸)0～1mg/L，活性炭(AC)2g/L，蔗糖30g/L，Ph5.8，琼脂6～8g/L。生根培养基为不添加激素的MS培养基。

现有朱顶红种苗的诱导培养方法周期较长、效率较低，且成本也比较高，不能满足工厂化、规模化生产的要求。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种朱顶红无菌苗再切割成苗方法，能快速有效地大量生产优质朱顶红种苗，适合工厂化生产。

为实现这样的目的，本发明的技术方案中，利用朱顶红组织培养产生的无菌苗为外植体，通过重复切割小鳞茎、培养、繁殖，不断获得子代。在诱导成苗和壮苗培养过程中，调节培养基的pH值、蔗糖浓度，添加植物生长抑制剂以及提高培养基中磷、钾元素的含量等技术手段，促进小鳞茎的诱导率和壮苗，提高朱顶红组培苗生长与繁殖速率。同时采用1/2MS培养基代替MS培养基以降低成本。移苗则采用两步移苗方式来提高幼苗成活率。

本发明的方法具体步骤为：

1、无菌苗的获得：选择优良品种的朱顶红鳞茎进行组织培养。培养基为：1/2MS+BA2mg/L+NAA1mg/L，pH5.8，糖30g/L，AC2g/L，琼脂6～8g/L；培养条件为：温度20～30℃，光照：16h光期/8h暗期。一个月后即能获得无菌苗。

2、无菌苗的切割：当得到的无菌苗鳞茎直径达到3～5mm时即可进行切割，对切割后的无菌苗继续诱导培养。诱导培养基为：1/2MS+BA 4mg/L+NAA1mg/L+KH₂PO₄40～120mg/L+TIBA(三碘苯甲酸)0.5mg/L，pH5.8～7.0，蔗糖30～60g/L，AC2g/L，琼脂6～8g/L。培养条件为：温度20～30℃，光照：16h光期/8h暗期。一般1个月左右能够得到长1cm的无菌幼苗。

3、幼苗壮苗：对长1cm的无菌幼苗进行壮苗培养，培养基为1/2MS+BA4mg/L+NAA1mg/L+KH₂PO₄60mg/L+TIBA0.5mg/L，pH5.8～7.0，蔗糖30～60g/L，AC2g/L，琼脂6～8g/L。培养条件为：温度20～30℃，光照：16h光期/8h暗期。

4、无菌苗的再切割：当得到的壮苗培养后的无菌苗小鳞茎直径达到3～5mm时，即可将其中一部分无菌苗继续切割，再对切割后的无菌苗进行新的诱导培养和壮苗培养；如此重复不断获得子代。将另一部分不再切割的无菌苗进行移苗。

5.移苗：将经壮苗培养且不再切割的无菌苗移植至蛭石中，保持水分充足，待幼苗叶片长至5～7cm时即可再次移苗到露地。移苗时，环境温度在10度以上，一般为10～30℃，并避免阳光直射。