[发明专利]携带人β珠蛋白基因的βIVS-II-654转基因小鼠模型的制备方法有效
申请号: | 200710047375.3 | 申请日: | 2007-10-24 |
公开(公告)号: | CN101418292A | 公开(公告)日: | 2009-04-29 |
发明(设计)人: | 曾溢滔;李伟;曾凡一;黄淑帧 | 申请(专利权)人: | 上海市儿童医院 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N15/12;C12N15/86;A01K67/027 |
代理公司: | 上海智信专利代理有限公司 | 代理人: | 缪利明 |
地址: | 200040上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 携带 珠蛋白 基因 sup ivs ii 654 转基因 小鼠 模型 制备 方法 | ||
1.一种携带人β珠蛋白基因的βIVS-II-654转基因小鼠模型的制备方法,其特征在于包 括以下步骤:
A、人β珠蛋白基因片段的克隆;
B、人β珠蛋白基因启动子的克隆;
C、将人β珠蛋白基因、人β珠蛋白基因启动子克隆到载体质粒,构建携带人β珠蛋 白基因的慢病毒载体LBG,所述慢病毒载体LBG是SEQ ID No.3所示的序列;
D、将慢病毒载体LBG与包装质粒共转染细胞,培养后获得病毒颗粒;
E、将病毒颗粒进行βIVS-II-654小鼠受精卵的卵周间隙显微注射,得到携带人β珠蛋白 基因的βIVS-II-654转基因小鼠。
2.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述载体质粒为FUGW-LMα。
3.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述包装质粒为包装结构基因质粒 pCMVΔR9和包装外壳蛋白质粒VSVG。
4.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述共转染的细胞为人胚肾细胞 293T。
5.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述人β珠蛋白基因片段是SEQ ID No.1所示的序列。
6.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述人β珠蛋白启动子是SEQ ID No. 2所示的序列。
7.一种慢病毒载体LBG,其特征在于,所述慢病毒载体LBG包含人β珠蛋白启动 子、目的基因人β珠蛋白基因片段,所述慢病毒载体LBG是SEQ ID No.3所示的序列。
8.如权利要求7所述的慢病毒载体LBG,其特征在于,所述人β珠蛋白基因片段是 SEQ ID No.1所示的序列。
9.如权利要求7所述的慢病毒载体LBG,其特征在于,所述人β珠蛋白启动子是SEQ ID No.2所示的序列。
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