[发明专利]猪附红细胞体的小鼠感染模型的构建方法

权利要求书

1、一种猪附红细胞体的小鼠感染模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

①从感染猪附红细胞体病的猪血中分离纯化出猪附红细胞体，从猪附红细胞体病猪血中分离出来的猪附红细胞体重悬于无菌的生理盐水中，此悬液为分离纯化的猪附红细胞体悬液；

②小鼠的饲养，饲养于熏蒸消毒的隔离室内；

③对小鼠静脉接种，对小鼠接种纯化的猪附红细胞体悬液，具体为：对7周龄SPF小鼠尾静脉注射100ul纯化的猪附红细胞体悬液；

④动物模型的检测，验证猪附红细胞体小鼠感染模型显示出附红细胞体感染红细胞的结构。

2、如权利要求1所述的猪附红细胞体的小鼠感染模型的构建方法，其特征是，所述的猪附红细胞体悬液，其中猪附红细胞体数目大于等于10⁷个。

3、如权利要求1所述的猪附红细胞体的小鼠感染模型的构建方法，其特征是，所述的感染，以分离纯化的猪附红细胞体作为感染源。

4、如权利要求1所述的猪附红细胞体的小鼠感染模型的构建方法，其特征是，所述的接种，是指：静脉注射。

5、如权利要求1所述的猪附红细胞体的小鼠感染模型的构建方法，其特征是，所述的检测，包括：鲜血压片镜检，PCR检测和透射电镜镜检三步法的综合检测。

6、如权利要求1所述的猪附红细胞体的小鼠感染模型的构建方法，其特征是，所述的鲜血压片检测，是指：感染3天后，分别将感染组和对照组小鼠进行尾静脉采血，将采集的血液压片，观察。

7、如权利要求1所述的猪附红细胞体的小鼠感染模型的构建方法，其特征是，所述的PCR检测，其的引物是根据猪附红细胞体1.8kb开放阅读框序列设计，上游为5′-CTGCC GATGT GTTAA GTCCT-3′，下游为5′-CTGGG TGTAT GAAGA GTGGT GT-3′，可扩增出长度为233bp的片段。

8、如权利要求1所述的猪附红细胞体的小鼠感染模型的构建方法，其特征是，所述的透射电镜检测，是指将实验组小鼠尾静脉血用2.5％的戊二醛固定2h，用0.1mol/L磷酸漂洗液漂洗三次，1％锇酸固定液固定2-3h，再用0.1mol/L磷酸漂洗液漂洗三次，梯度脱水，逐级浸透，包埋，切片，观察。