[发明专利]依博素及其质量控制方法

说明书

技术领域

本发明涉及依博素及其质量控制方法，属药物领域。

背景技术

类风湿性关节炎属于自身免疫性疾病，为常见病、多发病，目前仍缺乏有效治疗手段，在美国被列为危害人类健康的五大疾病之一，严重患者丧失工作能力。具WHO统计全世界患者达1.65亿，据了解我国患者多达2000万。依博素是经研究发现的一种具有抗白细胞介素1受体活性的微生物多糖，为链霉菌的代谢产物，在国内外属首次报导，已申请并获得国家专利(专利申请号：99110826.4)，该产生菌由中国医学科学院医药生物技术研究所分离自我国四川省峨嵋山土壤，经中国科学院微生物研究所对菌种进行分类鉴定，根据菌种形态，培养特征及分子生物学分类等研究确定其为唐得链霉菌。据研究结果显示，依博素是一种新型结构微生物胞外多糖，由8种单糖组成，其种类为鼠李糖、木糖、葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖、岩藻糖、半乳糖和半乳糖醛酸。具有较强的抗炎作用，亦具有明显的镇痛作用，对于急性、亚急性及慢性炎症，特别对于类风湿性关节炎有显著的抑制作用。随着科学技术的不断发展，药物也必须在保证产品质量稳定可控的基础上，才能不断的更新发展，由于依博素在国内外无生产和使用报导，产品的质量控制方法没有确定的标准，也没有统一有效的控制方法。因此，如何制定合理有效的质量控制方法，控制这种微生物多糖的质量，保证用药的安全性，使工艺控制更加严格合理，使广大消费者更加了解产品质量，是我们需要去研究解决的问题。

在专利申请号：99110826.4实施例3中提到“多糖的鉴定方法为：1.采用了凝胶色谱法测定了139A多糖的分子量，2.毛细管电泳分析确定多糖的组成”。通过该方法只能鉴定多糖的分子量和组成摩尔，仅凭这两点对于依博素的鉴定和质量控制是远远不够的。对于一种药物的质量控制我们必须要进行定性和定量的分析，从性状、鉴别、检查到含量测定。只有通过全面详细的质量控制方法的检测才能获得安全、合格的药物，从而制备出高效，优质的药物更好的为广大患者服务，也才能获得良好的经济效益。针对这些缺陷，本发明人通过全面的、科学的研究建立了一套质量控制方法。它包括1.性状：外观、色、臭、味以及溶解性的测定；鉴别：采用紫外、红外吸收、颜色反应以及气，质联用色谱法中任一项或全部鉴别；检查：干燥失重、灼灼残渣、重金属、蛋白质检查以及对分子量检测中的部分或全部；含量：药物中多糖的含量测定。这一质量控制方法操作简单，专属性强，稳定性好，精确度高的用于依博素质量控制的方法。

发明内容

本发明的技术方案是提供了依博素及其质量控制方法。

本发明提供了依博素，它含有多糖，其中，多糖中含有单糖的重量百分比为：鼠李糖3.0％-4.0％、木糖4.0％-6.0％、葡萄糖0.0％-4.0％、甘露糖3.0％-7.0％、阿拉伯糖12％-30％、岩藻糖3.0％-7.0％、半乳糖12％-40％和半乳糖醛酸3.0％-5.5％等8种单糖。采用分子排阻色谱法测定其峰位分子量为：40.0×10⁴-90.0×10⁴。

进一步优选地，多糖中含有单糖的重量百分比为：鼠李糖3.2％、木糖4.9％、葡萄糖3.9％、甘露糖6.8％、阿拉伯糖29.7％、岩藻糖6.8％、半乳糖39.4％和半乳糖醛酸5.3％。

其中，依博素中含多糖以八种单糖总量计，重量百分含量不得少于85.0％

本发明还提供了一种控制所述的依博素的质量的方法，其中包括定性控制和定量控制；其中定性控制为包括：外观、溶解性、颜色反应、紫外吸收光谱、红外吸收光谱、高压液相色谱、纯度检查；含量测定，采用苯酚-硫酸比色法测定：检测波长为400-600nm。

其中，所述的定量测定方法具体为：照苯酚-硫酸比色法测定：检测波长为400-600nm；称取苯酚于烧瓶中，加入铝片，碳酸氢钠，加热蒸馏，收集180-185℃馏分，置棕色容量瓶中，加蒸馏水至刻度溶解，即得苯酚溶液；按组成该微生物多糖的八种单糖的比例，精密称取干燥至恒重的鼠李糖、木糖、葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖、岩藻糖、半乳糖、半乳糖醛酸八种单糖，置容量瓶中溶解并定容；量取10-20ml于量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀即得对照品溶液；取本发明所述微生物多糖，精密称取，置容量瓶中，溶解定溶即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，置试管中分别加入苯酚溶液，混匀，迅速加入浓硫酸，摇匀后放置至室温，在400-600nm处测定吸光度值。