[发明专利]一种基因打靶用中间载体及其制备方法和用途无效
申请号: | 200710050165.X | 申请日: | 2007-09-29 |
公开(公告)号: | CN101397570A | 公开(公告)日: | 2009-04-01 |
发明(设计)人: | 周钦;胡忠国;吕小岩;张铮;魏于全 | 申请(专利权)人: | 四川大学华西医院 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N15/66 |
代理公司: | 成都虹桥专利事务所 | 代理人: | 武森涛 |
地址: | 610041四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基因 打靶 中间 载体 及其 制备 方法 用途 | ||
1.一种制备基因打靶用中间载体的方法,其特征在于包括以下步骤:
a、利用限制性内切酶HindIII和KpnI将含一个loxp位点和一个frt位点的片段从pk-11 载体上切下并装入pCDNA3.1(+)载体上,克隆获得pCDNA3.1-frt-loxp;
b、利用限制性内切酶SalI和BstXI将loxp位点从pCDNA3.1-frt-loxp载体上切下并装 入pGEM-Teasy载体上,克隆获得pGEM-Teasy-loxp;
c、利用限制性内切酶ApaI,将loxp位点从pGEM-Teasy-loxp载体上切下并装入pk-11 载体上,克隆获得目标载体。
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