[发明专利]甜茶多酚的分离提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及从甜茶中分离提取甜茶多酚的方法。

背景技术

甜茶(Rubus suavissims S.Lee)系蔷薇科悬钩子属多年生落叶灌木。甜茶野生资源分布在广西的金秀、鹿寨、昭平、岑溪、苍梧、藤县、贺县、桂平等县市，生于海拔500～1000m的丘陵山地常绿阔叶林或沟谷、林缘、灌木丛中，为广西特有植物。

甜茶叶在广西民间应用已有悠久历史，长期以来除当茶叶饮用之外，甜茶还入药用。甜茶性凉、无毒、有生津止咳、清热解毒、利咽润肺、消炎降压、降糖、减肥、抗过敏等功效。廖曼云等人对甜茶、甜茶素、甜茶水提物等作了毒理学研究，表明甜茶及其主要成分毒性低，安全性大，几无蓄积性。钟正贤等人利用甜茶提取物对小鼠作了咳嗽实验，表明甜茶具有止咳祛痰、抗炎、止痛和镇静作用。苏学素等及日本三得利公司对甜茶进行了抑制透明质酸酶的实验，证明甜茶水提物有抑制透明质酸酶的作用。田翠平等人的实验表明了甜茶提取物能极显著地降低STZ致高血糖大鼠血糖，增强其抗氧化能力，同时能刺激胰岛素的分泌。

甜茶多酚是一类复杂的酚类化合物的总合，包括黄酮类和水解多酚类，其中以水解多酚中的鞣花多酚为主，具有抗过敏活性。日本Nakahara，koichi等人采用溶剂萃取、柱层析、凝胶色谱分离联用的方法获得了GOD多酚含量高于90％的甜茶多酚，并解析了甜茶GOD多酚的结构，申请了关于含有抗过敏性成分GOD多酚的活性食品和药品的专利。他们在专利中阐明了甜茶的有效成分是甜茶多酚，它具有明显抑制柱状肥大细胞释放组胺的能力，从而具有抗炎、抗过敏的能力，对过敏性疾病如鼻炎、花粉症、皮炎、气喘等有明显改善作用，同时证明了甜茶多酚还是透明质酸酶良好的抑制物。

虽然甜茶多酚在日本等国已得到应用，但工业化的分离提取方法并未见报道，甜茶多酚的分离提纯研究和工业化生产及应用在国内至今仍为空白。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种工艺简单、有机溶剂只用乙醇、可工业化制备具有抗过敏活性的甜茶多酚的方法。

本发明以如下技术方案解决上述技术问题：

采用水提碱转溶法或醇提水沉法从干甜茶叶获得甜茶叶提取物，采用两次超滤截留后浓缩、干燥可获得含甜茶多酚≥50％的甜茶粉产品。

将两次超滤截留后的茶汁通过层析柱经吸附树脂处理后进行梯度洗脱，将70％乙醇洗脱液浓缩、干燥可获得含甜茶多酚≥90％的甜茶粉产品。

用水提碱转溶法提取甜茶叶得的茶汁，用NaOH溶液将茶汁的pH调整至8.5进行转溶后，滤去不溶物，用HCL或柠檬酸调整还原溶液pH至5.4后才进行超滤处理。

用醇提水沉法提取甜茶叶时，先将甜茶干叶与乙醇水溶液按重量比1∶10～30的比例进行提取，需蒸发回收乙醇后才进行超滤处理。

茶汁超滤可以分别选用1万～5万道尔顿分子量的有机高分子管式膜和1千～5千道尔顿分子量的有机高分子管式膜进行两次超滤处理，取两次超滤之中间段的超滤溶液进行后处理。

吸附树脂可以是聚酰胺、大孔吸附树脂或交换吸附纤维。

本发明甜茶多酚的分离提取方法突出优点是：

1、采用了超滤和树脂吸附分离技术相结合的方法优化甜茶多酚的分离工艺，本方法操作简单，可实现工业化生产。

2、生产过程不使用除了乙醇之外的有机溶剂，符合环保要求。产品符合食品和药品原料的要求。

3、本发明以广西甜茶为原料，通过调节生产工艺及参数，以Folin-Ciocalteau法分析总酚含量，可以生产出甜茶多酚含量分别大于50％和90％的产品，满足市场需要。

4、本发明的甜茶多酚产品，通过透明质酸酶抑制率体外实验和小鼠被动皮肤过敏反应、二硝基氯苯所致迟发型皮肤过敏反应的体内实验证明具有明显的抗过敏活性。

表1甜茶多酚的透明质酸酶抑制率