[发明专利]中药材中残留有机磷农药的检测方法

说明书

(一)技术领域：

本发明涉及一种检测方法，具体是中药材中残留有机磷农药的检测方法。

(二)背景技术：

有机磷农药是一类含磷的有机化合物，种类很多，目前大量生产与使用的至少有60多种，按其毒性可分为高毒(如对硫磷，俗称1605、敌敌畏、甲拌磷等)、中等毒、低毒三类。有机磷农药具有用药量小，杀虫效率高，选择作用强，对农作物药害小，使用经济，并因其性质不稳定，在自然界容易分解，在作物中残留时间极短，以及在生物体内易受酶作用而水解，在体内不蓄积等特点而被广泛应用。由于中药材的种植周期相对较长，在其生长过程中不可避免的要使用各种农药，尽管从采收到成为备用原料，基本上都需晒干或烘干，同时经历较长的储存过程，因此对所使用的有机磷农药而言，当用作原料使用时，基本上已降解，残留量较低甚至无法检出。但鉴于某些有机磷农药属高毒农药，对哺乳动物急性毒性较强，一旦被其污染，极易造成人畜急性中毒，因此《中国药典》2005年版一部附录中专门规定了“药材及制剂中有机磷农药残留量测定法”，说明了对中药材中有机磷农药残留量的测定具有其必要性和现实意义。

药典规定的检测方法是在供试品中先加入无水硫酸钠，再以乙酸乙酯作为熔媒进行超声提取2次，提取物稀释后置活性碳柱上，置多功能真空样品处理器上，用正己烷-乙酸乙酯洗脱分离，最后以色谱法分离检测出12种有机磷农药。经过近一年的检测实践证明，此方法具有提取效率高，操作快速简便等优点。但不足之处一是需要配置价格昂贵的多功能真空样品处理器，这对于一般的企业而言难以承受，限制了该检测方法的推广应用，使中药材中有机磷农药的检测项目难以开展，安全用药留下隐患。二是净化效果较差，具体表现是活性碳柱对去除样品中的色素效果不理想，导致在进入色谱分析时，对进样口系统、衬管、进样针、色谱柱有较大程度的污染，使仪器运行成本增高、重复性差。

(三)发明内容：

本发明的目的就是针对上述检测方法中所存在的问题而提出的一种易于推广应用，净化效果好，对色谱系统无污染的中药材中残留有机磷农药的检测方法。

本检测方法包括下述步骤：

(1)对照品溶液的制备

分别精密吸取浓度为1000ug/ml的乙酰甲胺磷、氧化乐果标准储备液40ul及敌敌畏、甲胺磷、甲基内吸磷、甲拌磷、二嗪磷、久效磷、乐果、甲基嘧啶磷、毒死蜱、甲基对硫磷、倍硫磷、对硫磷、马拉硫磷、杀扑磷、乙硫磷标准储备液各20ul于10ml容量瓶中，用丙酮定容至刻度，充分混匀，即得乙酰甲胺磷、氧化乐果浓度为4ug/ml，其它15种标准储备液浓度为2ug/ml的有机磷对照品混合溶液，备用；

(2)色谱条件

气相色谱仪：Agilent 6890N

色谱柱：DB-1701毛细管色谱柱，30m×0.32mm×0.25μm

进样口条件：载气为氮气，纯度大于99.999％；温度180℃；不分流模式，分流阀流量10ml/min，阀开启时间0.75min

柱温箱条件：初温100℃保持5min以5℃/min升到260℃

柱参数：恒压模式，流速1.8ml/min

检测器条件：火焰光度检测器，温度200℃，H2流量75ml/min，Air流量100ml/min，尾吹气氮气流量60ml/min

理论塔板数以敌敌畏计不低于5000

(3)对照品溶液的检测

取上述有机磷对照品混合溶液60ul于样品瓶中，加入丙酮540ul，充分混匀，得乙酰甲胺磷、氧化乐果浓度为0.4ug/ml，其它15种对照品浓度为0.2ug/ml的对照品混合溶液，在Agilent 6890N气相色谱仪及上述色谱条件下进行气相色谱分析，得出对照品色图谱；

(4)供试品的制备

精密称取药材粉末5g，加无水硫酸钠5g，活性炭0.2g，加入乙酸乙酯50ml，振摇30min，静置过夜，冰浴超声5min，放置，取上层液滤过，残渣加乙酸乙酯30ml，冰浴超声5min，放置，滤入上次滤液，用10ml乙酸乙酯分次洗残渣、滤纸，与上述滤液合并。取滤液于40℃减压浓缩至近干，用10ml二氯甲烷预淋洗PSA小柱，弃去淋洗液，用二氯甲烷少量溶解样品，并转移至柱中，用15ml二氯甲烷+90∶10丙酮分次洗涤浓缩瓶，洗脱PSA小柱，待洗脱液下降至填料上层，再用15ml丙酮+95∶5甲醇洗脱，控制柱流速，缓慢逐滴流下，接收全部洗脱液，于40℃减压浓缩至近干，用乙酸乙酯或丙酮溶解，定容至2ml，得供试品溶液，待测；

(5)供试品的检测