[发明专利]一种适用于1型鸭肝炎病毒抗体乳胶凝集检测试剂盒及应用无效
申请号: | 200710052821.X | 申请日: | 2007-07-24 |
公开(公告)号: | CN101101297A | 公开(公告)日: | 2008-01-09 |
发明(设计)人: | 胡薛英;彭婉芬;程国富;谷长勤;张万坡 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | G01N33/576 | 分类号: | G01N33/576;G01N33/543 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430070湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 适用于 肝炎 病毒 抗体 乳胶 凝集 检测 试剂盒 应用 | ||
1、一种适用于1型鸭肝炎病毒抗体检测的乳胶凝集试剂盒,它包含盒体和设在盒体内的核心试剂,它还包括阳性对照样品、阴性对照样品、样品管、刻度样品吸管、刻度乳胶吸管和观察结果用的载体,其特征在于,所述的核心试剂是由鸭肝炎种毒AV21111纯化并灭活的I型鸭肝炎弱毒致敏聚苯乙烯乳胶得到乳胶抗原,所述的阳性对照样品是1型鸭肝炎强毒抗血清,所述的阴性对照样品是无1型鸭肝炎母源抗体的1日龄雏鸭血清,所述的载体是带有凹窝的纸质乳胶凝集卡。
2、根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述的乳胶凝集卡凹窝为圆形,窝底为黑色,凹窝周围为白色。
3、根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,所述的乳胶凝集卡用油墨印制。
4、权利要求1所述的1型鸭肝炎病毒抗体检测的乳胶凝集试剂盒的制备方法,其步骤在于:
1)将1型鸭肝炎病毒种毒株AV21111进行增殖与纯化,得到乳胶抗原;
2)将步骤1)的乳胶抗原致敏乳胶颗粒,得到致敏乳胶;
3)制备I型鸭肝炎病毒抗体阳性对照血清和阴性对照血清;
4)制作用于承载样品和观察结果的纸质的乳胶凝集卡。
5、根据权利要求4所述的方法,其中纯化1型鸭肝炎病毒的方法是:
1)将I型鸭肝炎弱毒株AV21111无菌接种于鸡胚尿囊腔内,蜡封,并置于37.8℃孵化箱中培养,剔除24h内死亡的鸡胚,无菌收取24小时后死亡的鸡胚尿囊液备用;
2)在步骤1)的鸡胚尿囊液中加入1%的福尔马林溶液置于4℃灭活12h以上,先经5000rpm离心30min,取上清,反复冻融3次,10000rpm离心30分钟,取上清,15000rpm离心30分钟,取上清,60000rpm离心2h,去上清,按体积比取步骤1)的尿囊液体积的1/24的磷酸盐缓冲液(0.02M、pH7.2)洗涤沉淀,重悬得到纯化的I型鸭肝炎弱毒;
3)利用扫描电镜或核酸蛋白测定仪鉴定步骤2)的I型鸭肝炎弱毒纯度。
6、根据权利要求4所述的方法,其中步骤4)所述的乳胶凝集卡带有圆形凹窝,窝底为黑色,凹窝周围为白色。
7、权利要求1、2或3所述的乳胶凝集卡在制备乳胶凝集检测试剂盒中的应用。
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