[发明专利]一种用于牲畜的益生活菌微胶囊制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种用于牲畜的益生活菌微胶囊制剂，其特征在于它是由芯材、 各单菌的菌悬液、包埋材料和载体组成；其中菌悬液与芯材的重量份数 比为1∶2；芯材与菌悬液所形成的混合液与包埋材料的体积比为1∶3；各 单菌的菌悬液为：凝结芽孢杆菌，嗜酸乳杆菌，植物乳杆菌，乳酸乳杆 菌和粪链球菌；活菌含量分别为：嗜酸乳杆菌微胶囊≥1.0×10⁹cfu/g；植 物乳杆菌微胶囊≥1.0×10⁹cfu/g；凝结芽孢杆菌微胶囊≥1.0×10⁹cfu/g； 乳酸乳杆菌微胶囊≥1.0×10⁹cfu/g；粪链球菌微胶囊≥1.0×10⁹cfu/g。

2.如权利要求1所述的活菌微胶囊制剂，其中所述的芯材为重量份数 比为1∶1的微孔淀粉与乳糖混合物；包埋材料为3-4％的海藻酸钠溶液； 载体为1-1.5份玉米蛋白。

3.如权利要求1所述的活菌微胶囊制剂，其特征在于所述活菌制剂中 活菌总含量为1.0×10⁹cfu/g以上；微胶囊直径为1～2mm。

4.权利要求1所述活菌微胶囊制剂在作为饲料添加剂预防幼畜腹泻和 增加抵抗力方面的应用。

5.权利要求1所述活菌微胶囊制剂在制备治疗幼畜腹泻方面的应用。

6.一种制备权利要求1-5任一项所述活菌微胶囊制剂的方法，其特征 在于按如下步骤进行：

(1)益生活菌的培养：将各菌体使用相应斜面菌种培养，经液体一 级种子培养，液体二级培养，发酵罐单菌株纯增殖培养；

(2)活菌微胶囊的制备：采用连续高速离心机离心收集上述各菌体， 加入无菌水配制成1.0×10¹¹cfu/mL菌悬液，然后加入微孔淀粉与乳糖 (1∶1W/W)混合物，比例为1∶2V/W，均匀搅拌100-200r/min 30-60min；最 后加入3-4％海藻酸钠无菌溶液比例为1∶3V/V，通过胶囊自动发生器将微 粒滴入3-4％无菌氯化钙水溶液中，固化1-2h，制成活菌微胶囊；

(3)过滤收集活菌微胶囊，-50℃预冻2～3h，真空冷冻干燥，制得 干燥的活菌微胶囊；

(4)活菌计数：测定干燥的活菌微胶囊活菌含量为1.0×10⁹cfu/g以 上，加入1-1.5份玉米蛋白载体混合；

(5)将制得的活菌微胶囊按不同牲畜需求量，配比混合均匀，制成 活菌微胶囊制剂。

7.如权利要求6所述的制备方法，其中的活菌微胶囊由下述重量份数 的益生活菌微胶囊组成：凝结芽孢杆菌微胶囊0.5-1份；嗜酸乳杆菌微胶 囊1～1.8份；植物乳杆菌微胶囊1～1.5份；乳酸乳杆菌微胶囊0.5-1.5份； 粪链球菌微胶囊0.5-1份；其中各组分的活菌含量分别为：嗜酸乳杆菌微 胶囊≥1.0×10⁹cfu/g；植物乳杆菌微胶囊≥1.0×10⁹cfu/g；凝结芽孢杆菌 微胶囊≥1.0×10⁹cfu/g；乳酸乳杆菌微胶囊≥1.0×10⁹cfu/g；粪链球菌微 胶囊≥1.0×10⁹cfu/g。

8.如权利要求6所述的制备方法，其中各发酵罐单菌株纯培养条件： 温度25-40℃，通风量9-13m³/h，罐压0.02-0.09MPa，接种量1.5-7.5％， 时间19-72小时，发酵液活菌数达到10⁸-10⁹cfu/ml；

其中益生活菌的发酵培养基(g/L)：

凝结芽孢杆菌：蛋白胨5-15g，酵母膏5-15g，葡萄糖3-9g，MgSO₄·7H₂O 0.5-1.5g，K₂HPO₄ 1-3g，MnSO₄ 50μg，pH7.0；

植物乳杆菌：蛋白胨5-15g，牛肉膏5-15g，酵母膏3-7g，葡萄糖15-25g， 柠檬酸二钠1.5-3.5g，K₂HPO₄ 1-3g，醋酸钠2.5-7.5g，MgSO4·7H₂O 1-3g，MnSO₄·4H₂O 0.01g吐温10ml，pH6.0-6.5。