[发明专利]一种生产5－氨基乙酰丙酸的工程菌及其构建方法

权利要求书

1.一种生产5-氨基乙酰丙酸的工程菌，其特征在于此菌是含有类球红细菌的5-氨基乙酰丙酸合成酶基因的工程菌，中文名为大肠埃希氏菌，拉丁文学名为Escherichia coli Rosetta(DE3)-pET28a-R.S.hemA，在中国专利局指定的保藏单位中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为：CGMCCNo.1939。

2.根据权利要求1所述的生产5-氨基乙酰丙酸的工程菌，其特征在于所说的5-氨基乙酰丙酸合成酶基因核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

3.根据权利要求1所述的生产5-氨基乙酰丙酸的工程菌，其特征在于所说的5-氨基乙酰丙酸合成酶氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列或在其基础上减少、替代和增加一个氨基酸残基的具有5-氨基乙酰丙酸合成酶活性的氨基酸序列。

4.根据权利要求1所述的生产5-氨基乙酰丙酸的工程菌的构建方法，其特征在于包括以下步骤：

1)从类球红细菌的菌液中提取总基因组DNA；

2)用聚合酶链式反应扩增出5-氨基乙酰丙酸合成酶基因；

3)将扩增出的5-氨基乙酰丙酸合成酶基因与克隆载体pMD-18T simple连接，进行DNA测序，得到SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；

4)将测序后的目的基因片断与表达载体pET28a连接，构建出重组子pET28a-R.S.hemA；

5)将重组子pET28a-R.S.hemA转化至宿主菌中，即可。

5.根据权利要求4所述的生产5-氨基乙酰丙酸的工程菌的构建方法，其特征在于所说的宿主菌为大肠杆菌Rosetta(DE3)。