[发明专利]胶原－壳聚糖/纤维蛋白胶不对称支架及其制备方法和应用

权利要求书

1.胶原-壳聚糖/纤维蛋白胶不对称支架，其特征在于该不对称支架包括胶原-壳聚糖多孔材料层和纤维蛋白胶层，纤维蛋白胶层均匀设置在胶原-壳聚糖多孔材料层的表面，胶原-壳聚糖多孔材料层和纤维蛋白胶层之间形成有交界面；所述的胶原-壳聚糖多孔材料具有80～150μm的孔径结构；纤维蛋白胶具有5～20μm的微小孔径。

2.根据权利要求1所述的胶原-壳聚糖/纤维蛋白胶不对称支架的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

1)用酸性溶液分别配置质量浓度为0.5％～5％的胶原溶液和壳聚糖溶液，将壳聚糖溶液加入胶原溶液中，搅拌均匀，得胶原-壳聚糖混合溶液；

2)将胶原-壳聚糖混合液注入模具中，采用冷冻-冻干法，冷冻成固体，冻干，得到胶原-壳聚糖多孔支架；

3)将上述步骤2)所得的胶原-壳聚糖多孔支架在80～130温度下真空干热物理交联处理，再置于醛类化合物或碳化二亚胺类化合物中交联12～48小时，清洗后，再次冷冻、冻干制备得到胶原-壳聚糖多孔支架；

4)将胶原-壳聚糖多孔支架进行浸泡消毒，然后用磷酸盐缓冲液漂洗；

5)将纤维蛋白原用DMEM培养基或PBS配至浓度为4mg/ml～80mg/ml；

6)将凝血酶用DMEM培养基或PBS稀释成浓度至30IU/ml～600IU/ml ；

7)将纤维蛋白原溶液均匀涂覆在已消毒的胶原-壳聚糖多孔支架表面，然后再将凝血酶滴加在其上，静置直至多孔膜材料表面形成一层固态的纤维蛋白胶，从而获得胶原-壳聚糖/纤维蛋白胶不对称支架。

3.根据权利要求2所述的胶原-壳聚糖/纤维蛋白胶不对称支架的制备方法，其特征在于其中壳聚糖的重量百分比含量为5％～30％。

4.根据权利要求2所述的胶原-壳聚糖/纤维蛋白胶不对称支架的制备方法，其特征在于碳化二亚胺类化合物采用摩尔浓度比为0.5～5∶1的1-乙基-3-3(二甲基胺丙基)-碳化二亚胺溶液和N-羟基丁二酰亚胺混合溶液。

5.根据权利要求2～4任意一项权利要求所述的胶原-壳聚糖/纤维蛋白胶不对称支架的制备方法，其特征在于纤维蛋白原的浓度为20mg/ml～80mg/ml。

6.根据权利要求2～4任意一项权利要求所述的胶原-壳聚糖/纤维蛋白胶不对称支架的制备方法，其特征在于凝血酶的浓度为150IU/ml～600IU/ml。

7.根据权利要求2～4任意一项权利要求所述的胶原-壳聚糖/纤维蛋白胶不对称支架的制备方法，其特征在于纤维蛋白原溶液的涂覆量为25μl/cm²～100μl/cm²。

8.根据权利要求1所述的胶原-壳聚糖/纤维蛋白胶不对称支架在构建组织工程皮肤中的应用。