[发明专利]一种海洋弧菌的多重PCR反应试剂盒及其检测方法无效
申请号: | 200710069213.X | 申请日: | 2007-06-05 |
公开(公告)号: | CN101067155A | 公开(公告)日: | 2007-11-07 |
发明(设计)人: | 王国良;祝璟琳;金珊 | 申请(专利权)人: | 宁波大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 宁波海曙奥圣专利代理事务所 | 代理人: | 程晓明 |
地址: | 315211浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 海洋 弧菌 多重 pcr 反应 试剂盒 及其 检测 方法 | ||
1、一种海洋弧菌的多重PCR反应试剂盒,包括PCR反应液,所述的PCR反应液由10×PCR反应缓冲液、dNTP、Hot star Taq酶、致病菌种的DNA引物和灭菌离子水配制而成,其特征在于所述的致病菌种的DNA引物为下述三种弧菌的DNA引物,即:
溶藻弧菌的DNA引物:
上游引物为:5’-cga gta cag tca ctt gaa agc c-3’,
下游引物为:5’-cac aac aga act cgc gtt acc-3’,
哈维氏弧菌的DNA引物:
上游引物为:5’-gaa gca gca ctc acc gat-3’,
下游引物为:5’-ggt gaa gac tca tca gca-3’,
副溶血弧菌的DNA引物:
上游引物为:5’-gaa agt tga aca tca tca gca cga-3’,
下游引物为:5’-ggt cag aat caa acg ccg-3。
2、如权利要求1所述的一种海洋弧菌的多重PCR反应试剂盒,其特征在于所述的PCR反应液为23.5μl,包括10×PCR反应缓冲液2.5μl、dNTP2.0μl、Hot star Taq酶0.2μl、最终浓度为0.4μmol/L~0.8μmol/L的溶藻弧菌引物0.5μl、最终浓度为0.4μmol/L~0.8μmol/L的哈维氏弧菌引物0.5μl、最终浓度为0.16μmol/L~0.8μmol/L的副溶血弧菌引物0.5μl,用灭菌去离子水定容。
3、如权利要求2所述的一种海洋弧菌的多重PCR反应试剂盒,其特征在于溶藻弧菌引物的最终浓度为0.4μmol/L、哈维氏弧菌引物的最终浓度为0.4μmol/L、副溶血弧菌引物的最终浓度为0.4μmol/L。
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