[发明专利]识别水禽共同IgY抗原的单克隆抗体及其制备方法

权利要求书

1.一种识别15种水禽共同IgY抗原的单克隆抗体，所述15种水禽为斑头雁、鸿雁、鸬鹚、夜鹭、白鹭、遗鸥、斑尾塍鹬、中杓鹬、绿翅鸭、花脸鸭、赤颈鸭、斑嘴鸭、麻鸭、番鸭和鹅，其特征在于：该单克隆抗体是用纯化的斑头雁、鸬鹚、鸭和鹅的血清IgY蛋白为抗原进行联合免疫，通过杂交瘤细胞方法筛选获得的能特异识别上述15种水禽共同IgY抗原的单克隆抗体。

2.如权利要求1所述识别15种水禽共同IgY抗原的单克隆抗体的制备方法，其特征在于以下步骤：

(1)用辛酸-硫酸铵盐析法从斑头雁、鸬鹚、鸭和鹅的血清中粗提IgY蛋白，经Superdex 200凝胶层析获得纯化的斑头雁、鸬鹚、鸭和鹅的血清IgY蛋白；

(2)用纯化的斑头雁、鸬鹚、鸭和鹅的血清IgY蛋白为抗原，将此4种抗原按4种免疫组合免疫小鼠，诱导产生针对不同水禽的共同IgY抗原的抗体；4种免疫组合为：斑头雁IgY-鸭IgY-鹅IgY，斑头雁IgY-鸬鹚IgY-鹅IgY，斑头雁IgY-鸬鹚IgY-鸭IgY，鸬鹚IgY-鸭IgY-鹅IgY；

(3)通过杂交瘤细胞方法，以上述4种免疫组合小鼠脾细胞制备分泌抗水禽IgY单克隆抗体的杂交瘤细胞株；

(4)用间接ELISA方法，以15种水禽的纯化IgY为检测抗原，检测上述杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体，筛选出识别15种水禽共同IgY抗原的单克隆抗体。