[发明专利]杜鹃兰组培根状茎菌根化育苗技术

权利要求书

1.利用单菌丝团分离方法，从杜鹃兰根中共分离出7种菌根菌，都为丝核菌，其代号为Rhizoctonia R1、Rhizoctonia R2、Rhizoctonia R3、Rhizoctonia R4、Rhizoctonia R5、Rhizoctonia R6、Rhizoctonia R7，其分离比例为1∶3∶1∶1∶2∶1∶5，对这些丝核菌进行单菌培养，根据各菌种分离比例，称取不同量的各菌种菌丝配制复合液体菌剂，将液体菌剂应用于杜鹃兰组培根状茎和已经分化产生根和芽的组培苗栽培，此技术主要包括以下步骤：

1)菌根菌的培养

2)复合菌根菌液体菌剂的配制

3)根状茎菌根化育苗

4)已分化组培苗菌根化栽培

2.根据权利1要求所述的方法，其特征在于，步骤1)试管菌种转接PDA平皿，25℃培养15天活化，利用直径0.5cm的打孔器从平皿中打取3个菌饼，三点法接种于直径90cm的PDA平皿，25℃培养至菌落快长满平皿，利用打孔器打取5～10个菌饼，转接于装有100mlPDA液体培养基的500ml三角瓶中，25℃静置培养1个月备用。

3.根据权利1要求所述的方法，其特征在于，步骤2)利用真空泵对培养的液体菌种进行抽滤获得菌丝，根据单菌丝团分离法获得的各菌种的比例称取相应质量的各菌种菌丝，放入匀浆机中打碎混匀，然后将菌液加无菌水稀释，制得菌丝浓度为14g/L的液体菌剂。

4.根据权利1要求所述的方法，其特征在于，步骤3)所用菌根化基质为(体积比)：阔叶锯木屑∶蛭石∶珍珠岩＝4∶2∶1或腐质土∶阔叶锯木屑∶珍珠岩＝2∶2∶1，基质的含水量以用手可挤出2～3滴水为宜。

5.根据权利1要求所述的方法，其特征在于，步骤3)具体做法是选择长1～2cm且已分化出芽的组培根状茎，清洗干净表面的培养基；将配制好的基质装入直径10cm的营养杯或苗床中，底层为3cm厚的无菌基质；用喷雾器在此层表面喷洒液体复合菌剂(75ml/m²)，或覆一层1cm厚的液体菌剂与基质混合物(75ml菌剂/10L基质)，或每个栽苗点施1ml菌液。将根状茎基部插在基质表面，或带菌基质中，或施菌栽苗点，芽向上，然后覆盖2cm厚的基质盖住根状茎。

6.根据权利1要求所述的方法，其特征在于，步骤4)菌根化栽培基质为松林下的已腐熟的松针土，具体做法与根状茎菌根化相同，但组培苗叶要露出基质。