[发明专利]猪繁殖与呼吸综合征病毒超强变异株RT－PCR试剂盒

权利要求书

1、一种用于检测保藏编号为CGMCC No.1964的猪繁殖与呼吸综合征病毒超强变异株的引物对，其特征在于针对猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因第1594～1680位核苷酸缺失片断而设计，从如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列任意截取长度为5～60个连续核苷的寡核苷酸。

2、如权利要求1所述的引物对，其特征在于如SEQ IDNO：3和SEQ IDNO：8；SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6和SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：12所示的核苷酸序列。

3、一种检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的试剂盒，其特征在于包括如权利要求1所述的引物对。

4、一种如权利要求3所述的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的试剂盒，其特征在于包括选自如权利要求2所述的引物对中的一种。

5、如权利要求3或4所述的试剂盒，其特征在于还包括：RNA提取试剂，RT-PCR反应试剂，电泳检测试剂，阴性对照、阳性对照和变性液。

6、如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于包括：

(1)RNA提取试剂：由醋酸钠溶液350μl，酚/氯仿/异戊醇混合液3.5ml，异丙醇3.5ml，75％乙醇12ml，无菌DEPC水450μl，RNA酶抑制剂24μl组成；

(2)RT-PCR反应试剂：由RT反应液200μl，其中含反转录引物序列：RT引物5’-TCgCCCTAAT-3’、RNA酶抑制剂24μl、AMV反转录酶12μl、PCR反应液200μl、0.5U/μL Taq DNA聚合酶25μl、矿物油300μl；

(3)电泳检测试剂：包括50×TAE电泳缓冲液20ml、溴化乙锭溶液100μl、上样缓冲液50μl；

(4)阴性对照350μl、阳性对照350μl、变性液7ml。