[发明专利]检测微痕量甲基磷酸二甲酯的材料及其制备方法无效
申请号: | 200710092621.7 | 申请日: | 2007-08-28 |
公开(公告)号: | CN101113955A | 公开(公告)日: | 2008-01-30 |
发明(设计)人: | 霍丹群;侯长军;杨丽敏;法焕宝 | 申请(专利权)人: | 重庆大学 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78;C12Q1/44 |
代理公司: | 重庆大学专利中心 | 代理人: | 胡正顺 |
地址: | 400044重*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 痕量 甲基 磷酸 二甲 材料 及其 制备 方法 | ||
1.一种检测微痕量甲基磷酸二甲酯的材料,其特征在于其组分和重量百分数为:
磺酸基四苯基卟啉:0.02%~0.37%
面粉:99.63%~99.98%。
2.按照权利要求1所述的检测微痕量甲基磷酸二甲酯的材料,其特征在于一种检测微痕量甲基磷酸二甲酯材料的组分和重量百分数为:磺酸基四苯基卟啉0.09%、面粉99.91%;或磺酸基四苯基卟啉0.02%、面粉99.98%;或磺酸基四苯基卟啉0.37%、面粉99.63%。
3.一种检测微痕量甲基磷酸二甲酯材料的制备方法,其特征在于具体的方法步骤如下:
(1)酶液的制备
以市售面粉为原料,按面粉∶蒸馏水的重量比为1∶4~6的比例,在面粉中加入蒸馏水,搅拌10~60min后,再以3000~6000r/min的离心速度,离心分离10-15min,收集上层清液,静置8~24h;
(2)TPPS溶液的配制
在无水乙醇溶液中加入TPPS固体粉末,搅拌充分溶解后,就制备出浓度为30.08~111.3μmol/L的TPPS溶液;
(3)K9玻璃片活化
将K9玻璃片用无水乙醇清洗表面,再将表面洁净的K9玻璃片放入戊二醛溶液中,浸泡20~120min进行活化,然后取出,再将活化后的K9玻璃片放入pH值为7.5~8.18的磷酸盐缓冲液中,其磷酸盐缓冲液为磷酸氢二钠-磷酸二氢钠溶液或磷酸氢二钠-磷酸二氢钾溶液;
(4)酶的固定化
在第(1)~(3)步完成后,取出第(3)步活化后的K9玻璃片,放入第(1)步制备出的植物酯酶酶液中,浸泡80~100min,进行酶的固定化,然后取出固定化酶的K9玻璃片,再放入pH值为7.5~8.18的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠或磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液中;
(5)TPPS的固定化
在第(4)步完成后,取出第(4)步固定化酶后的K9玻璃片,放入第(2)步制备出的TPPS溶液中,浸泡作用2~5min,进行TPPS固定化,取出其K9玻璃片,自然风干或将载玻片放入干燥器中干燥。
4.按照权利要求3所述的检测微痕量甲基磷酸二甲酯材料的制备方法,其特征在于一种检测微痕量甲基磷酸二甲酯材料的制备方法的具体方法步骤如下:
(1)酶液的制备
以市售面粉为原料,按面粉∶蒸馏水的重量比为1∶5的比例,在面粉中加入蒸馏水,搅拌30min后,再以4000r/min的离心速度,离心分离12min,收集上层清液,静置12h;
(2)TPPS溶液的配制
在无水乙醇溶液中加入TPPS固体粉末,搅拌充分溶解后,就制备出浓度为84.23μmol/L的TPPS溶液;
(3)K9玻璃片活化
将K9玻璃片用无水乙醇清洗表面,再将表面洁净的K9玻璃片放入戊二醛溶液中,浸泡20min进行活化,然后取出,再将活化后的K9玻璃片放入pH值为8.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液中;
(4)酶的固定化
在第(1)~(3)步完成后,取出第(3)步活化后的K9玻璃片,放入第(1)步制备出的植物酯酶酶液中,浸泡90min,进行酶的固定化,然后取出固定化酶的K9玻璃片,再放入pH值为8.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液中;
(5)TPPS的固定化
在第(4)步完成后,取出第(4)步固定酶化后的K9玻璃片,放入第(2)步制备出的TPPS溶液中,浸泡作用3min,进行TPPS固定化,取出其K9玻璃片,自然风干。
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