[发明专利]人SDF－1α的制备及由此获得的人SDF－1α及其用途

权利要求书

1. 一种纯化人基质细胞衍生因子-1α的方法，其特征在于，该方法包括：

(1)采用超声和/或溶菌酶处理诱导表达了以包涵体形式存在的人基质细胞衍生因子-1α的大肠杆菌，离心分离得到包涵体；

(2)将包涵体中的蛋白变性、复性，得到变性-复性后的蛋白溶液；

(3)将该变性-复性后的蛋白溶液经过阴离子交换层析纯化，得到纯度大于95％的人基质细胞衍生因子-1α。

2. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述包涵体采用以下步骤获得：

(a)从人骨髓组织中克隆人基质细胞衍生因子-1α基因，将其插入到原核表达质粒中，构建并得到人基质细胞衍生因子-1α的原核表达载体；

(b)用该原核表达载体转化大肠杆菌，得到转化的大肠杆菌；

(c)在该转化的大肠杆菌中诱导表达，产生包含有人基质细胞衍生因子-1α的包涵体。

3. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述原核表达质粒为pET28a(+)。

4. 如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(c)中的诱导表达是在30-40℃过夜进行。

5. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述人基质细胞衍生因子-1α具有SEQ ID NO：2所示的第2-71位氨基酸序列。

6. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，使用pH为10.5-12.0的含7-8M尿素的变性液进行变性。

7. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，通过用pH为10.0-12.0的含Tris-HCl、乙二胺四乙酸的溶液稀释，使变性后的蛋白复性。

8. 一种人基质细胞衍生因子-1α，它具有SEQ ID NO：2所示的第2-71位氨基酸序列。

9. 一种药物组合物，它含有权利要求9所述的人基质细胞衍生因子-1α。

10. 权利要求8所述的人基质细胞衍生因子-1α在制备用于促进骨髓造血的药剂中的用途。