[发明专利]人SDF－1α的制备及由此获得的人SDF－1α及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及人SDF-1α的制备及纯化、由此制得的人SDF-1α及其用途。

背景技术

趋化因子对骨髓造血的调节作用目前成为新一代造血系统药物研发的焦点。趋化因子对骨髓造血的作用包括：促进骨髓造血，抑制造血细胞凋亡；是骨髓中血小板发生所必需的因子，对化疗引起的血小板减少具有治疗作用；促进人造血细胞体外扩增和活性的维持；促进CD34+造血干/祖细胞归巢、增殖和成熟(柴克霞，贾乃镛.趋化因子及其受体对造血细胞调控作用的研究进展，临床荟萃，2003，18(8)：473-474)。骨髓基质细胞衍生因子(stromal cell-derived factor1，SDF-1)是目前仅有的、知道比较清楚的、对人和小鼠造血干细胞具有较强趋化作用的趋化因子，它是趋化因子CXC家族中的一个成员，又称前B细胞刺激因子。SDF1或CXCR4基因敲除的小鼠表现出相同的造血衰竭(Nagasawa T，Hirota S，Tachibana K等，Defects of B-cell lymphopoiesis and bone marrow myelopoiesis inmice lacking the CXC chemokine PB SF/SDF-1.Nature，1996，382(6592)：6352-638；Zou YR，Kottmann AH，Kuroda M等，Function of the chemokine receptorCXCR4 in haematopoiesis and cerebellar development.Nature，1998，393(6685)：595-599)。SDF1/CXCR4功能轴在造血干细胞/祖细胞的维持、扩增和穿梭迁移中均起关键作用(Lapidot T，Dar A，Kollet O.How do stem cells find way home？Blood，2005，106，(6)：1901-1910；Kucia M，Reca R，Miekus K，Trafficking ofnormal stem cells and metastasis of cancer stem cells involve similar mechanisms：pivotal role of the SDF-1-CXCR4 axis.Stem Cells，2005，23(7)：879-894)。

SDF-1分为两种亚型SDF-1α和SDF-1β，后者在羧基端比前者多了4个氨基酸残基，两者在表达和功能上未发现区别。人和小鼠的SDF-1只相差一个氨基酸，同源性99％(魏立，孔佩艳.SDF-1/CXCR-4系统与造血干细胞动员.重庆医学，2003，8 32(8)：1098-1100；Czech A.Stromal cell derived factor 1(SDF-1)：Itsstructure and function[J].Cas Lek Cesk，2001，140(12)：355；Shirozu M，NakanoJ，Inazawa K.Structure and chromosomal location of the human stromal cell-derivedfactor 1(SDF-1)gene[J].Genomics，1995，28(3)：495-500；Loetscher M，GeiserT，O’Reilly T等.Cloning of a human seven transmembrane domain receptor，LESTR，that is highly expressed in leukocytes[J].J Biol Chem，1994，269(11)：232-237)。

SDF-1对造血干/祖细胞、T细胞和单核细胞等能有效地起到趋化作用，是一种与骨髓造血功能密切相关的趋化因子。SDF-1与其受体CXCR4相互作用可以促进造血干/祖细胞的增殖和分化，并且与其他因子协同作用可促进造血干/祖细胞向外周血的动员；SDF-1能介导造血干/祖细胞跨越骨髓-内皮细胞层迁移的过程从而实现造血干细胞归巢至骨髓。因此深入研究SDF-1的作用及其机理并且开发蛋白重组药物对于治疗造血系统相关疾病及对于造血干细胞移植具有重要的意义。