[发明专利]检测乳腺癌特征蛋白的优化质谱模型及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种检测乳腺癌血清特征蛋白的质谱模型，其特征在于：从血清中筛选出8个上 调蛋白和3个下调蛋白作为特征蛋白；选取上述11个特征蛋白中的任意两个或两个以上 的蛋白，根据各蛋白质峰的质荷比m/z值及以该蛋白的临界峰值均值M，建立了乳腺癌患 者与正常人、乳腺良性疾病、乳腺癌淋巴结转移及乳腺癌远端转移患者两两鉴别的血清特 征蛋白质谱模型；其中乳腺癌患者与正常人鉴别的质谱模型A由m/z＝3164，M≥3.30； m/z＝3404，M≤13.76绘制而成，乳腺癌患者与乳腺良性疾病鉴别的质谱模型B由m/z＝7977， M≥14.88；m/z＝6116，M≤9.71绘制而成，乳腺癌患者与乳腺癌淋巴结转移鉴别的质谱模 型C由m/z＝4180，M≥22.64；m/z＝4202，M≥1.76绘制而成，乳腺癌患者与乳腺癌远端 转移鉴别的质谱模型D由m/z＝11683，M≥1.88；m/z＝8938，M≥2.75绘制而成。

2、一种检测乳腺癌血清蛋白质谱模型的制备方法，包括以下步骤：

1)4℃条件下2小时内收集经病理明确诊断的乳腺癌患者血清及经体检确定为正常的 健康者的血清作为两组血清标本，进行-80℃低温冷冻备用；

2)采用WCX磁珠对所述乳腺癌患者及正常人的两组血清标本的蛋白进行吸附；

3)用激光解吸/电离飞行时间质谱仪，用氮激光仪(337nm)和80cm或120cm飞 行管分析阵列，或用电喷雾电离已洗脱的血清蛋白后用液相色谱质谱联用仪(LC-MS)对 结合在弱阴离子表面的WCX磁珠或C8及C18疏水基质磁珠上的两组血清蛋白进行读取， 由此获得两组蛋白质谱图谱；

4)在每次实验数据收集前，用标准蛋白及质谱的标准化质控O型血清校正仪器，使 蛋白质分子量误差＜0.01％和临界峰值均值M的CV＜5～10％，并精确地、定量地收集乳 腺癌患者和正常人优化的血清质谱图谱数据；

5)对所得数据进行统计学处理，根据乳腺癌患者和正常人血清之间蛋白峰的差异， 检测出2组血清蛋白质谱图谱之间有11个稳定的差异蛋白及其临界峰值，8个上调蛋白和 3个下调蛋白作为特征蛋白；将所述11个差异蛋白作为乳腺癌蛋白质谱模型的特征蛋白；

6)选取所述11个特征蛋白中任意两个或两个以上的蛋白，以各蛋白质峰的质荷比m/z 值及以该蛋白的临界峰值均值M构成用于检测乳腺癌血清特征蛋白质谱模型；其中所述的 特异蛋白质质荷比m/z和临界峰值均值M分别为m/z＝3164，M≥3.30；m/z＝3404，M≤13.76； m/z＝7977，M≥14.88；m/z＝6116，M≤9.71；m/z＝4180，M≥22.64；m/z＝4202，M≥1.76； m/z＝11683，M≥1.88；m/z＝8938，M≥2.75。

3、选取如权利要求1所述的血清11个蛋白中任意两个或两个以上的特征蛋白，利用 该质谱模型，将受检者血清中相应蛋白质的质荷比及该蛋白的临界峰值均值M与本发明的 质谱模型逐一进行对比分析，就可应用于乳腺癌的早期检测、筛查和复发转移的评估。