[发明专利]人类免疫缺陷病毒抗体确认试剂

权利要求书

1、一种人类免疫缺陷病毒抗体确认试剂，其特征在于，包括HIV抗体确认条，反应液，洗液，碱性磷酸酶-羊抗人IgG结合物，BCIP/NBT显色底物，阳性参考血清，阴性参考血清，所述试剂采用HIV-I型特异性蛋白gp160、gp120、gp41、p66、p24以及HIV-II型特异性蛋白gp36与待测人类血清中的相应抗体特异结合，兔抗人IgG多克隆抗体与人类血清中的IgG结合，之后加入羊抗人IgG-碱性磷酸酶结合物，其将与重组抗原结合的HIV特异抗体、与兔抗人IgG结合的抗体以及包被在膜上的人源IgG相结合，加入底物后发生反应导致显色反应的原理制备而成。

2、权利要求1的确认试剂，所述试剂由一组产品组成一个试剂盒，其中主要组成成分如下：

HIV抗体确认条，反应液，洗液，碱性磷酸酶-羊抗人IgG结合物，BCIP/NBT显色底物，阳性参考血清，阴性参考血清，另外还有，反应板，对比卡片，结果报告单，产品说明书。

3、权利要求2的确认试剂，每一试剂盒中包括以下组成：

1、HIV抗体确认条                  20条

2、反应液                         1瓶

3、洗液                           1瓶

4、碱性磷酸酶-羊抗人IgG结合物     1瓶

5、BCIP/NBT显色底物               1瓶

6、阳性参考血清                   1瓶

7、阴性参考血清                   1瓶

8、反应板                         2个

9、对比卡片                       1个

10、结果报告单                    1张

11、说明书                        1份。

4、权利要求3的确认试剂，其中

HIV抗体确认条，组成为混合纤维素膜以及包被在该膜上的重组抗原，其制备方法如下：

A.使用包被缓冲液将重组抗原以及兔抗人IgG和人源IgG稀释到合适的浓度；

B.使用流式划线仪以划膜速度为20mm/s，喷量为0.2μl/mm将各蛋白均匀包被于混合纤维素膜上；

C.包被完成的混合膜采用室温吹干2小时的方法进行干燥；

D.干燥后真空包装，放在寒冷干燥处备用；

反应液，组成为0.8％NaCl、0.02％KCl和0.05％吐温-20的0.01M Tris-HCl，其制备方法如下：

A.按照上述配方配制；

B.使用NaOH颗粒将PH值调到7.4；

C.使用0.45μm滤膜过滤除菌；

D.密封贮存于2-8℃环境中，

洗液，组成为10mM CB缓冲液添加200PPM PEG，500PPM Tween-20，500PPM甘油，100PPM Proclin300，其制备方法如下：

A.按照上述配方配制；

B.使用NaOH颗粒将PH值调到9.8-10.0；

C.加入100PPM的指示剂，使其在正常状态下呈蓝色

D.使用0.45μm滤膜过滤除菌；

E.密封贮存于2-8℃环境中，

碱性磷酸酶-羊抗人IgG结合物，组成为碱性磷酸酶-羊抗人IgG结合物，10mMTris-cl，20％胎牛血清，100PPM PEG，500PPM甘油和100PPM Proclin300其制备方法如下：

A.按照上诉配方配制；

B.使用HCl将PH值调到6.4-6.7；

C.加入100PPM的指示剂，使其在正常状态下呈红色

D.使用0.45μm滤膜过滤除菌；

E.密封贮存于2-8℃环境中，

BCIP/NBT显色底物，

阳性参考血清，其制备方法如下：

A.选用ELISA测定效价不低于1∶200，HIV抗体全病毒确认试剂检测结果为全条带阳性的血清10份；

B.混合血清，采用60℃处理1小时；

C.使用0.45μm滤膜过滤除菌；

D.除菌过滤后密封贮存于2-8℃环境中，

阴性参考血清，其制备方法如下：

A.选用经两种ELISA试剂测定、一种确认试剂检测、一种核酸检测试剂同时检测结果为HIV抗体阴性血清10份；

B.混合血清，采用60℃处理1小时；

C.使用0.45μm滤膜过滤除菌；

D.除菌过滤后密封贮存于2-8℃环境中。