[发明专利]KNSL4的转移相关基因功能和预测乳腺癌患者预后的标志物用途及其应用方法

权利要求书

1.驱动蛋白样DNA结合蛋白(kinesin-like DNA binding protein，Kid，KIF22，Accession No.NP_015556)基因(kinesin-like 4，KNSL4，AccessionNo.NM_007317)的转移相关基因功能。

2.KNSL4基因表达水平预测乳腺癌患者预后的标志物用途，其特征在于：基于KNSL4基因表达水平可以预测乳腺癌患者的预后，KNSL4表达水平高的患者预后好，表达水平低的患者预后差。

3.基于KNSL4基因表达水平预测乳腺癌患者预后的检测及应用方法，其特征在于：

a.提取肿瘤患者原发癌组织标本的细胞总RNA；以RNA为模板逆转录合成cDNA；以cDNA为模板，用KNSL4基因和管家基因的特异性引物和荧光标记探针进行实时定量PCR扩增，计算KNSL4基因mRNA的相对表达量为2^-ΔCt，其中，ΔCt＝Ct_KNSL4-Ct_GAPDH(C_T为实时定量PCR时荧光信号达到设定阈值时所经过的循环数)；

b.根据乳腺癌患者复发转移阳性病例和复发转移阴性病例的KNSL4 mRNA表达量，确定预后判断的临界值，KNSL4 mRNA表达量高于临界值的患者预后好，而低于临界值的患者预后差。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于以原发癌组织中KNSL4 mRNA表达量为1.40×10^-3作为对肿瘤患者预后判断的临界值，高于该临界值的患者则判断为预后好，低于该临界值则判断为预后差。

5.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于：

KNSL4基因实时定量RT-PCR的引物和探针序列是：上游引物5’-CAAGGAGGGAGTGGAATG-3’；下游引物5’-GGAGGTGGACGACGAGTAG-3’；特异性荧光标记探针序列：5’(FAM)-GCGGCGATCTCAGGAGCTGGTCGCT-3’(TAMRA)。

6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于荧光报告基团还可以是SYBR Green I、VIC、TETJOE、NED、TAMRA、Cy3、Cy5、ROX、Texas Red等荧光染料。