[发明专利]一种广玉兰总内酯提取物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于天然药物有效成分提取制备领域，具体涉及从广玉兰中提取玉兰总内酯的工艺，本发明还涉及玉兰总内酯在抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

广玉兰(Magnolia grandiflora L.)，又名荷花玉兰，为木兰科木兰属植物，常绿乔木。广玉兰原产北美洲东南部，19世纪末20世纪初引入我国，目前在长江流域及以南各城市广为栽培。广玉兰属阳性树种，喜光，耐半阴，是优良的绿化观赏树种，抗SO2、氯气等能力强，其叶入药少，主要用于高血压病(1、中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志<第三十卷第一分册>北京：科学出版社.1996：125；2、斐鉴，等.中国药用植物志<第五册>.北京：科学出版社，1957：31)。广玉兰叶中含有多种生物碱及萜类成分(吴征镒，等.新华本草纲要<第一册>.上海：上海科学技术出版社，1988：58.)。陈兴荣(陈兴荣，等.荷花玉兰化学成分研究.中药材[J].2000，23(3)：159-160)分离出四个成分，包括丁香树脂醇、小白菊内酯、闭鞘姜酯、β-谷甾醇。文献(Two new germacranolides from Magnolia gradiflora.J.Asian Nat Prod Res.2001，3(2)：95-102)报道了从广玉兰中分离的倍半萜内酯类化合物，其中包括2-α-羟基-二氢小白菊内酯、小白菊内酯、木香内酯等内酯类化合物。但目前对广玉兰的研究还停留在单体成分分离、结构鉴定和细胞生物活性测定方面，距离实际生产应用尚远，而对广玉兰有效部位总内酯提取的研究报道，还未见有报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种广玉兰抗肿瘤有效部位玉兰总内酯提取物。本发明中玉兰总内酯的含量为大于等于50％而小于100％，优选玉兰总内酯的含量为大于等于50％而小于80％。本发明中的玉兰总内酯，主要包括小白菊内酯和木香烃内酯，小白菊内酯的重量百分比为35％～60％，广木香内酯重量百分比为10％～20％，小白菊内酯和广木香内酯的总量应大于等于50％而小于80％。

本发明的另一目的在于提供一种制备本发明所述的具有抗肿瘤作用的有效部位玉兰总内酯的方法，本发明的制备方法简便易行，适合工业化生产，解决了常见的萃取中出现的乳化问题。

本发明在提取制备有效部位玉兰总内酯时，先用水浸泡，这样除去了玉兰中大部分水溶性非有效成分，还可以避免后续中萃取的乳化现象。本发明主要以玉兰叶为原料，经水浸泡后采用80％～95％的乙醇提取，经石油醚萃取脱脂后再用60％～80％的乙醇反萃石油醚，即可除去杂志成分如叶绿素，又可减少有效成分内酯的损失，经提取萃取简单工序，可得到玉兰总内酯粗提物，工艺简便，可操作性强。经初步富集的玉兰总内酯，含量已相对较醇，再经硅胶柱层析进一步精制，除去内酯中的一些非有效成分，从而可以得到更纯的玉兰总内酯，工业使用性极强。

实现本发明的方法主要包括两步工序：首先是玉兰总内酯的初步富集工序，以玉兰叶或/和花为原料，干燥粉碎成粗粉后，用去离子水浸泡提取两次，过滤，去除水浸泡提取液，残渣用极性醇或酮提取3次，合并各次提取液后，浓缩，用石油醚萃取脱脂2～3次，石油醚萃取液再用60％～80％的乙醇反萃后，将乙醇萃取液合并到经石油醚萃取的溶液中，浓缩除去石油醚和乙醇，浓缩液再用氯仿萃取2～3次，合并萃取液浓缩干燥得氯仿提取物，即为玉兰粗内酯。本发明还包括另一个工序，即粗内酯的精制工序。将上述得到的粗内酯用硅胶进行精制，硅胶粒度为80～300目，粗内酯与硅胶的用量比为1∶30～50，用混合溶剂为流动相梯度洗脱，收集含小白菊内酯和木香烃内酯的流份，浓缩干燥既得本发明所述的玉兰总内酯。经精制得到的玉兰总内酯，在需要的情况下还可以经过进一步硅胶柱层析进行进一步精制，可得到纯度更高的玉兰总内酯提取物。

本发明中的在提取玉兰叶时可以是浸泡提取，也可以是渗漉提取，还可以是回流提取，只要能达到提出玉兰叶中的内酯成分，均包括在本发明中。提取所用的溶剂，可以是甲醇、乙醇、丙酮、丙醇、正丁醇、乙酸乙酯中的任一种，也可以是这几种溶剂的混合溶剂，优选乙醇，更优选80％～95％的乙醇。

在硅胶柱层析过程中，混合溶剂系统可以是石油醚-丙酮20∶1-1∶3、石油醚-乙酸乙酯20∶1-1∶3、己烷-丙酮20∶1-1∶3、己烷-乙酸乙酯20∶1-1∶3、氯仿-乙酸乙酯20∶0-1∶2、氯仿-丙酮20∶0-2∶1、氯仿-甲醇20∶0-1∶1中的任一种。