[发明专利]细胞角蛋白19片段化学发光免疫分析测定试剂盒及其制备方法

权利要求书

1、一种细胞角蛋白19片段化学发光免疫分析测定试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

1)细胞角蛋白19片段CYFRA21-1校准品；

2)细胞角蛋白19片段CYFRA21-1单克隆抗体包被的固相载体；

3)酶标记的细胞角蛋白19片段CYFRA21-1单克隆抗体；以及

4)上述酶所作用的化学发光底物。

2、如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述细胞角蛋白19片段CYFRA21-1单克隆抗体优选为BM19.21和/或KS19.1。

3、如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述固相载体为微孔板、塑料珠、塑料管或磁性颗粒。

4、如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述酶为碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶。

5、如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述化学发光底物为1，2-二氧乙烷类衍生物、鲁米诺或异鲁米诺。

6、如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述1，2-二氧乙烷类衍生物为(金刚烷)-1，2-二氧乙烷、3-(2′-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3″-磷酰氧基)苯基-1，2-二氧乙烷、CSPD或CDP-Star。

7、一种制备权利要求1所述试剂盒的方法，其特征在于包括以下步骤：

1)配制细胞角蛋白19片段CYFRA21-1校准品；

2)以细胞角蛋白19片段CYFRA21-1单克隆抗体包被固相载体；

3)用酶标记细胞角蛋白19片段CYFRA21-1单克隆抗体；

4)分装上述细胞角蛋白19片段CYFRA21-1校准品、酶标记的细胞角蛋白19片段CYFRA21-1单克隆抗体和该酶所作用的化学发光底物；以及

5)组装为成品。

8、如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述细胞角蛋白19片段CYFRA21-1单克隆抗体优选为BM19.21和/或KS19.1。

9、如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述包被固相载体的步骤2)包括以下步骤：

I)包被

采用0.05M pH值为9.6的碳酸盐缓冲液或0.046M pH值为4.6的柠檬酸缓冲液与适当浓度的细胞角蛋白19片段CYFRA21-1单克隆抗体混合制成包被液，并将其负载于固相载体上；

II)用生理盐水洗涤上述固相载体；以及

III)封闭

配制封闭液，基于1000mL所述封闭液包含0.2g NaH₂PO₄·2H₂O、2.9gNaH₂PO₄·12H₂O、10g BSA和1mL生物防腐剂，所述封闭液的pH值为7.0～7.6，然后将所得封闭液负载于上述洗涤后的固相载体上。

10、如权利要求7或9所述的方法，其特征在于，所述固相载体为微孔板、塑料珠、塑料管或磁性颗粒。

11、如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述酶为碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶。

12、如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述化学发光底物为1，2-二氧乙烷类衍生物、鲁米诺或异鲁米诺。

13、如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述1，2-二氧乙烷类衍生物为(金刚烷)-1，2-二氧乙烷、3-(2′-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3″-磷酰氧基)苯基-1，2-二氧乙烷、CSPD或CDP-Star。