[发明专利]乳酸乳球菌和嗜热链球菌中胆盐水解酶与胞外多糖的提取方法有效
申请号: | 200710123108.X | 申请日: | 2007-06-28 |
公开(公告)号: | CN101333519A | 公开(公告)日: | 2008-12-31 |
发明(设计)人: | 刘慧;张红星;钟德寿;艾启俊;董瑞婷 | 申请(专利权)人: | 北京农学院 |
主分类号: | C12N9/00 | 分类号: | C12N9/00;C12N1/20;C12R1/46 |
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地址: | 102206北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 乳酸 球菌 链球菌 盐水 多糖 提取 方法 | ||
1.一种利用乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp.lactis)KS4CGMCC No.1807,嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)Tx CGMCC No.1810提取胞外多糖的方法,其特征在于:所述乳酸菌的发酵液以8000r/min,4℃离心10min,收集上清液;加入1/5体积pH5.0的10%三氯乙酸于4℃振荡处理30min;以10000r/min,4℃离心10~15min,收集上清液;加入3倍体积的95%冷乙醇于4℃处理11~12h,离心,条件同上,收集沉淀的多糖物质;以蒸馏水溶解多糖物质,脱脂棉过滤除去不溶物,再以预处理的透析袋于4℃透析过夜,所述预处理是先用50%乙醇煮沸10min,而后用含2%碳酸氢钠的1mmol/L EDTA溶液煮沸10min,再以蒸馏水煮沸3次,每次换水煮沸1min,透析液即为胞外多糖提取液;将50mL或100mL胞外多糖提取液注入500mL无菌冻干瓶内,在-25℃条件下预冻至冻结状态,在美国产LABCONCO冷冻真空干燥机上于0.16~0.18mBar真空度、冷阱温度为-55℃条件下升华干燥36~72h,其干燥物即为乳酸菌胞外多糖粗制品;干燥后的胞外多糖呈白色或略带浅黄结晶状态。
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