[发明专利]一种妊娠相关血浆蛋白A的检测方法

权利要求书

1.一种妊娠相关血浆蛋白A的检测方法，检测标本中妊娠相关血浆蛋白A以PAPP-A/proMBP复合物的形式存在，通过针对不同抗原的两株抗体检测PAPP-A抗原分子，一株为作为捕获抗体的PAPP-A特异性抗体，所述PAPP-A特异性抗体包被固相载，结合标本中的PAPP-A抗原分子；一株为使用抗嗜伊红主要碱性蛋白前体抗体作为检测抗体，用于结合标记物，经底物显色进行定量测定。

2.如权利要求1所述的妊娠相关血浆蛋白A的检测方法，其特征在于，所述标记物为酶、荧光素、放射性核素、化学发光物，通过不同的标记物使用配套仪器，进而定量检测标本中的PAPP-A含量。

3.如权利要求1或2所述的妊娠相关血浆蛋白A的检测方法，其特征在于，所述检测方法为双抗体夹心法检测血清或血浆中PAPP-A浓度的方法，将抗PAPP-A特异性抗体吸附于固相载，加入含PAPP-A的待检标本与之结合，温育后洗涤，加入辣根过氧化酶或其他标记物标记的抗ProMBP标记抗体，经底物显色进行定量测定。

4.如权利要求3所述的妊娠相关血浆蛋白A的检测方法，其特征在于，用包被液将抗PAPP-A抗体进行稀释处理；冲洗并弃去孔内液体，加入磷酸盐洗涤液，漂洗；加入小牛血清白蛋白封闭液，制备抗体结合的酶标板孔；将样品及标准液进行处理；在酶标板孔中加入标准液、待检样品，进行孵育；冲洗并弃去孔内液体，加入磷酸盐洗涤液，漂洗；加抗ProMBP酶标抗体，进行孵育；冲洗并弃去孔内液体，加入磷酸盐洗涤液，漂洗；加底物液显色。

5.如权利要求4所述的妊娠相关血浆蛋白A的检测方法，其特征在于，用包被液将抗PAPP-A抗体进行稀释处理后，按100ul/孔加入酶标板孔，并保持4℃的温度包被过夜。

6.如权利要求4所述的妊娠相关血浆蛋白A的检测方法，其特征在于，所述磷酸盐洗涤液为使用0.05％Tween-20的磷酸盐洗涤液。

7.如权利要求4所述的妊娠相关血浆蛋白A的检测方法，其特征在于，按200-250ul/孔加入0.5％小牛血清白蛋白封闭液，室温时封闭2-3小时或37℃时封闭1-2小时，也可在4℃时封闭过夜，然后弃去孔内封闭液。

8.如权利要求4所述的妊娠相关血浆蛋白A的检测方法，其特征在于，加抗ProMBP酶标抗体时，按50-100ul/孔加入新鲜配制的酶标抗体，室温或37℃下孵育1小时。

9.如权利要求4所述的妊娠相关血浆蛋白A的检测方法，其特征在于，加底物液显色后，加入硫酸终止液。

10.如权利要求4所述的妊娠相关血浆蛋白A的检测方法，其特征在于，使用酶标仪于450nm处测，根据标准曲线，计算标本PAPP-A的浓度。