[发明专利]重组人源过氧化氢酶的制备方法及其应用无效
申请号: | 200710126722.1 | 申请日: | 2007-06-15 |
公开(公告)号: | CN101148659A | 公开(公告)日: | 2008-03-26 |
发明(设计)人: | 周珮;史训龙;冯美卿;黄海;李继扬 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C12N9/08 | 分类号: | C12N9/08;C12N15/09;C12N1/19;A61K38/44;A61P35/00;A61P17/02;A61P17/18 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人: | 吴桂琴 |
地址: | 20043*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 重组 过氧化氢酶 制备 方法 及其 应用 | ||
1.重组人源过氧化氢酶的制备方法,其特征在于包括下述步骤:
(1)将可编码人源过氧化氢酶的基因嵌入含适当转录启动子的表达载体中构建重组质粒;
(2)将该重组质粒转化到适当的宿主细胞中;
(3)于适合该细胞表达过氧化氢酶的条件下培养该转化细胞;
(4)纯化所表达的人源过氧化氢酶。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述的过氧化氢酶其来源是人组织和/或血浆。
3.根据权利要求1所述的方法,其中所述的宿主细胞选自细菌,酵母或昆虫细胞。
4.根据权利要求1或3所述的方法,其中所述的宿主细胞是毕氏甲醇酵母pichiapastoris,保藏单位:CGMCC,保藏编号:CGMCC No.1825。
5.根据权利要求1所述的方法,其中所述步骤(4)的纯化是以硫酸铵沉淀,有机溶剂沉淀,疏水层析法和离子交换法,分子排阻法,将所表达的过氧化氢酶予以纯化。
6.一种表达人源的过氧化氢酶的重组质粒,其特征是所述重组质粒是采用基因工程技术将人源过氧化氢酶基因嵌入表达载体。
7.根据权利要求6所述的重组质粒,其基因来源为人组织和/或血浆。
8.根据权利要求6所述的重组质粒,其表达载体选自细菌,酵母或昆虫表达系统的表达载体。
9.根据权利要求1的方法所制得的人源的过氧化氢酶在制备外源性抗感染、抗氧化损伤,抗衰老或抗肿瘤药物中的用途。
10.根据权利要求8的用途,其中外源性抗感染是抗急性肺炎;外源性抗氧化损伤是抗烧伤等氧自由基引起的急性氧化损伤;抗衰老是抗长期氧自由基损伤引起的衰老病理状况。
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