[发明专利]流式细胞术同步检测肿瘤中多种细胞蛋白表达的方法

权利要求书

1.一种流式细胞术同步检测肿瘤中多种细胞蛋白表达的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

(1)将新鲜的肿瘤组织制备成单细胞悬液；

(2)调节单细胞悬液浓度为±10⁶细胞/100μl；

(3)在一个试管中加入步骤(2)得到的单细胞悬液，分别按荧光标记抗体的试剂说明的配比浓度加入能够区分不同待测细胞的荧光标记抗体5-20μl，充分混匀，室温避光反应15～45分钟；

(4)在上述试管中，加入待测蛋白的抗体，充分混匀，室温避光反应15～45分钟；

(5)离心去除上清液，以清除未结合的荧光标记抗体；

(6)悬浮细胞后上流式细胞仪检测、分析多种细胞的蛋白表达。

2.根据权利要求1所述的流式细胞术同步检测肿瘤中多种细胞蛋白表达的方法，其特征在于步骤(3)中所述的待测细胞为肿瘤细胞、基质细胞、血管内皮细胞、浸润淋巴细胞或血细胞中的两种或两种以上的细胞。

3.根据权利要求2所述的流式细胞术同步检测肿瘤中多种细胞蛋白表达的方法，其特征在于所述的肿瘤细胞为鳞癌细胞、腺癌细胞、未分化癌细胞、肉瘤细胞或肿瘤干细胞。

4.根据权利要求2所述的流式细胞术同步检测肿瘤中多种细胞蛋白表达的方法，其特征在于所述的血细胞为淋巴细胞、单核细胞、粒细胞或造血干细胞。